Mouse Flt-3L ELISA Kit

Mouse Flt-3L ELISA Kit即小鼠 Fms 樣酪an酸激酶 3 配體（Flt-3L）酶聯免疫吸附測定試劑盒。

檢測原理

• 包被：將針對小鼠 Flt-3L 的特異性捕獲抗體預包被在酶標板的孔壁上，形成固相抗體。

• 抗原抗體結合：加入待檢測的小鼠樣本，樣本中的 Flt-3L 會與固相化的捕獲抗體特異性結合。

• 形成夾心結構：再加入生wu素標記的檢測抗體，它能夠與已結合在捕獲抗體上的 Flt-3L 特異性結合，從而形成 “捕獲抗體 - Flt-3L - 生wu素化檢測抗體” 的夾心復合物。

• 酶結合：隨后加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的鏈霉親和素，鏈霉親和素與生wu素具有高度親和力，會特異性結合到生wu素化的檢測抗體上。

• 顯色與檢測：加入底物溶液，如四甲基聯苯胺（TMB），在 HRP 的催化作用下，TMB 發生顯色反應，顏色由無色變為藍色，顏色的深淺與樣本中 Flt-3L 的濃度成正比。最后加入終止液終止反應，使用酶標儀在特定波長下測定吸光度值，通過與標準曲線對比，計算出樣本中 Flt-3L 的含量。

試劑盒組成

• 預包被板：一般為 96 孔或 48 孔聚苯乙烯板，表面已包被好捕獲抗體，為 Flt-3L 的結合提供固相載體。

• 標準品：一系列已知濃度的 Flt-3L 蛋白標準溶液，用于繪制標準曲線，通常濃度范圍覆蓋了試劑盒的檢測范圍。

• 檢測抗體：生wu素標記的特異性抗體，可與 Flt-3L 特異性結合，用于檢測已與捕獲抗體結合的 Flt-3L。

• 酶結合物：通常是 HRP 標記的鏈霉親和素，用于與生wu素化的檢測抗體結合，催化底物顯色反應。

• 底物溶液：常用 TMB 溶液，在 HRP 的作用下發生顯色反應，產生可檢測的信號。

• 終止液：如硫酸溶液，用于終止顯色反應，使顏色穩定以便于酶標儀讀數。

• 洗滌緩沖液：用于洗滌酶標板，去除未結合的物質，減少非特異性信號。

• 稀釋液：用于稀釋樣本、標準品和檢測抗體等，使其達到合適的工作濃度。

適用樣本類型

• 血清：采集小鼠血液后自然凝固，離心后得到的上清液，可反映小鼠體內循環系統中 Flt-3L 的水平。

• 血漿：使用抗凝劑采集小鼠血液，離心后獲得的上清液。不同抗凝劑可能對檢測結果有影響，需按試劑盒要求選擇。

• 細胞培養上清：培養小鼠細胞后收集的培養液，可用于檢測細胞分泌到細胞外的 Flt-3L。

• 組織勻漿：將小鼠組織經過研磨等處理制成勻漿，離心后的上清液，可用于檢測組織中 Flt-3L 的表達情況。

性能指標

• 靈敏度：一般可達到較低的檢測限，如某些試劑盒的靈敏度可達幾 pg/ml，能夠檢測到樣本中極低濃度的 Flt-3L。

• 檢測范圍：通常有一個較寬的檢測區間，例如 10 - 1000 pg/ml，以滿足不同樣本中 Flt-3L 含量的檢測需求。

• 精密度：包括板內精密度和板間精密度，以變異系數（CV%）表示。優質的試劑盒板內 CV% 通常小于 10%，板間 CV% 小于 15%，保證實驗結果的重復性和穩定性。

• 特異性：試劑盒中的抗體對小鼠 Flt-3L 具有高度特異性，與其他類似蛋白或物質的交叉反應極低，確保檢測結果準確反映 Flt-3L 的含量。

應用領域

• 血液學研究：在研究小鼠造血系統疾病如白血病、再生障礙性貧血等時，通過檢測 Flt-3L 的水平，可了解造血微環境的變化以及造血干細胞的增殖分化狀態，為疾病的診斷和治療提供依據。

• 免疫學研究：在研究免疫細胞的發育和免疫反應的調節時，Flt-3L 與樹突狀細胞等免疫細胞的發育和功能密切相關。使用該試劑盒檢測 Flt-3L 含量，有助于深入了解免疫調節機制以及免疫相關疾病的發病機制。

• 腫瘤研究：在小鼠腫瘤模型中，Flt-3L 的表達與腫瘤的生長、轉移和免疫逃逸等過程有關。檢測腫瘤組織或血清中的 Flt-3L 水平，可為腫瘤的治療和預后評估提供參考。