細胞名稱

結腸癌細胞

種屬

人

生長狀態

貼壁生長

培養條件

培養基類型：DMEM（Hyclone SH30243.01)培養基

FBS（SCL澳洲胎牛血清(貨號:S20100A)): 10%

抗生素：雙抗

培養條件：37℃，CO2: 5%

傳代方法

收到細胞后，在倒置顯微鏡下觀察細胞生長狀態：

如果沒長滿，將培養瓶用75%酒精消毒后在超凈臺內更換新鮮培養液，繼續培養。

如果細胞已經長滿（約80%-90%）則傳代后繼續培養。

貼壁細胞傳代方法：

1 棄去培養基，用不含鈣、鎂離子的PBS洗1-2次。

2 加1ml 0.25%的胰酶（含0.02%EDTA），讓胰酶與大部分細胞接觸后放入37℃培養箱內，隨時觀察細胞狀態變化，待細胞大部分變圓后加*培養基終止消化。

懸浮細胞傳代方法：可以直接傳代也可以離心法傳代。

1 直接傳代是讓懸浮細胞慢慢沉淀在瓶底后，將上清吸掉1/2-2/3，吹打細胞形成細胞懸液后，分別接種到其他培養皿或培養瓶中繼續培養。

2離心法傳代是將細胞連同培養液一并轉移到離心管內， 1000rpm，5分鐘，去除上清，加新的培養液到離心管內，吹打細胞形成細胞懸液后，分別接種到其他培養皿或培養瓶中繼續培養。

 一般沒有特殊說明，細胞一般是一傳二。

凍存方法

70% *培養基，20%FBS，10%DMSO，現用現配。

儲存：液氮中長期保存。

注

1 觀察細胞在低倍鏡下觀察，便于整體估計細胞密度。

2 在運輸過程中可能會導致一些貼壁不牢的細胞發生部分脫落，可離心吹打后重新種入瓶中培養。

3 收到細胞后若發現培養瓶破損、細胞污染等，請拍照并在三天內與我們。