PRE人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞培養(yǎng)

來源：生物試劑銷售中心 2015年01月21日 10:47

PRE人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞

細(xì)胞培養(yǎng)說明：

拿到細(xì)胞后，先用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶外部，再在顯微鏡下觀察，看細(xì)胞是否懸浮，如果懸浮，吸出培養(yǎng)基，放入離心管，離心，倒掉上層培養(yǎng)基，加入5ml 新的DMEM 高糖培養(yǎng)基(+10%FBS)，重懸，放入培養(yǎng)瓶，再放進(jìn)37℃，5%CO₂的培養(yǎng)箱中。
如果細(xì)胞正常貼壁，先吸出一部分培養(yǎng)基，放入溫箱中穩(wěn)定一段時(shí)間，再根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀況和實(shí)驗(yàn)需要進(jìn)行處理。傳代：先倒掉舊的培養(yǎng)基，然后用D-hank’s緩沖液洗兩遍，再加1ml 0.25%的胰蛋白酶消化液，在顯微鏡下觀察，等到細(xì)胞*脫落下來，加5ml新的培養(yǎng)基終止消化，用移液管吹散，根據(jù)細(xì)胞量在細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)留下一部分細(xì)胞，其他吸出去，然后在培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加滿5ml培養(yǎng)基。再放到37℃，5%CO₂的培養(yǎng)箱中。

換液：用D-hank’s緩沖液洗一遍，再加入新的5ml培養(yǎng)基，在放入37℃，5%CO₂的培養(yǎng)箱中。

注意：上述處理細(xì)胞的步驟都要在潔凈臺(tái)里面操作。

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