在我公司錢為新員工培訓ELISA試劑盒產品的過程中,新員工對其避光反應的原因有些不解,本月初的時候也有客戶問過,當時上海滬鼎生物公司的技術人員對ELISA常規注意中避光反應的道理解說內容是這樣的:
其實這個主要是看顯色的時候用的是什么底物了,OPD的話要避光,因為這種底物受光照后會自行變色,如果用TMB底物的話,就沒這么嚴格了, 其他的步驟中像抗原綁定、洗滌之類也都不用避光的,只有在做完二抗洗滌完上酶顯色底物的時候。因為大部分的底物對光敏感的,見光會分解,所以要求避光操作。當顯色完成后(顯色時間是比較短的,需要預先摸索好)加入顯色終止液后溶液顏色會在幾個禮拜之內保持穩定,也不用再避光了。
其他反應步驟加蓋封板膜的作用不是避光,而是防止反應過程中有異物落入板孔,從而對檢測結果造成影響,同時加蓋封板膜還能減少液體的蒸發,保持反應體系的均衡,保證檢測結果的準確性。
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