單克隆抗體藥物綜述

   摘 要: 通過淋巴細胞雜交瘤技術或基因工程技術制備單克隆抗體藥物 ,已經成為生物制藥領域的一個重要方面 ,由于單克隆抗體藥物專一性強、 療效顯著 ,因此成為近年來研究的熱點藥物之一。此文就單抗藥物的分類、應用進行了綜述 ,并對其應用前景及存在的不足作了概述。

    關鍵詞:單克隆抗體 抗體藥物 靶向 聯用

自 1975 年Koeh ler 和M ilstein 首先報道利用小鼠雜交瘤細胞制備單克隆抗體以來, 經過近 30 年的發展, 單抗技術在生命科學研究及醫學實踐方面作出了杰出的貢獻, 已經成為了現代生物技術產業的支柱之一。

然而, 盡管單抗推動了生物診斷技術的革命, 但是在將單抗應用于人體疾病的治療方面, 卻在長時間內遲遲沒有進展。早期的臨床試驗結果都不盡人意, 這是因為鼠源單抗應用于人體有許多限制].

現今上市的單抗藥物, 治療的領域主要集中在腫瘤、 自身免疫疾病、 器官移植排斥及病毒感染等領域。由于單抗具有明確的作用位點, 與靶位點親和力高, 而且通過改造的抗體其免疫原性大大減弱, 這些因素使得單抗在臨床治療中具有特異性強、 見效快、 副作用較低等優點, 因而單抗治療有著廣闊的前景。目前, FDA 批準上市的 17 個單抗藥物中即有 8 個是用于治療淋巴細胞腫瘤、 乳腺癌及結直腸癌等, 而在開發階段的單抗也有一半以上是與治療各種癌癥相關。可以預見, 在未來幾年來將有更多的治療性單抗藥物上市, 其*將進一步擴大。

目前, 單抗類藥物的市場銷售逐年提升的年均增長幅度在20%以上, 表現強勁。 用于治療非霍奇金淋巴瘤的單抗藥物R ituxan 已成為世界*的抗腫瘤藥物, 2003 年銷售為 14 . 89億美元, 2002 年為 11 . 63 億美元, 在 2002 年zui前 50位商標名處方藥中排名 43 位。用于治療關節炎的單抗藥物Rem icade, 2002 年銷售額為 12 . 97 億美元, 當年藥物銷售* 37 位。2000 年世界單抗藥物的銷售額為 22 . 05 億美元, 據F ro st&Sullivan 預測, 到 2003 年銷售額將達到 47 億美元。

下面就單克隆抗體藥物的研究進展作一綜述。

1　 單克隆抗體藥物的分類

單抗藥物一般分為:治療疾病(尤其是腫瘤)的單抗藥劑、 抗腫瘤單抗偶聯物、 治療其他疾病的單抗。單抗藥劑針對的靶點通常為細胞表面的疾病相關抗原或特定的受體。如:zui早被美國 FDA批準用于治療腫瘤的單抗藥物利妥昔單抗;抗腫瘤單抗偶聯物 ,或稱免疫偶聯物( Immunoconjugate) , 由單抗與有治療作用的物質(如:放射性核素、 毒素和藥物等)兩部分構成 ,其中包括放射免疫偶聯物、 免疫毒素、 化學免疫偶聯物 ,此外還有酶結合單抗偶聯物、 光敏劑結合單抗偶聯物等。

2　 作為腫瘤治療藥劑的單克隆抗體藥物

2. 1　 利妥昔單抗

在自身免疫性疾病形成過程中 ,B 細胞起重要作用。CD20是前B細胞向成熟淋巴細胞分化過程中表達的表面抗原 ,參與調節B細胞的生長和分化。利妥昔單抗(美羅華)是一種針對 CD20抗原的人鼠嵌合型單克隆抗體 ,是*個被FDA批準用于臨床治療的單抗。進入人體后可與 CD20 特異性結合導致 B 細胞溶解 ,從而抑制 B 細胞增殖 ,誘導成熟 B細胞凋亡 ,但不影響原始B細胞。它能通過介導抗體依賴的細胞毒性(ADCC) 、 補體依賴的細胞毒性(CDC)作用和抗體與CD20分子結合引起的直接效應 ,包括抑制細胞生長 ,改變細胞周期以及凋亡等方式殺死淋巴瘤細胞。

由于利妥昔單抗藥物可以提高腫瘤細胞對化療的敏感性 ,所以利妥昔單抗藥物的優勢就在于與其他治療藥物及治療方式配合使用。臨床研究表明美羅華單藥或聯合化療治療腫瘤具有良好的療效和安全性 ,但還是存在一定的毒副作用。夏忠軍等進行的臨床研究:34例確診惰性淋巴瘤的患者接受含利妥昔的方案化療 ,結果總有效率為 92. 3 % ,*緩解率為60. 0 %。主要不良反應為骨髓抑制 ,其它不良反應包括惡心嘔吐、 輕度脫發和肝功能受損等。張曉艷等對 4例 CD20陽性非霍奇金淋巴瘤(NHL) 病人進行了5次利妥昔單抗聯合自體外周血干細胞移植(APBSCT)的治療研究 ,結果顯示所有病人均對利妥昔單抗耐受良好 ,植入后在 8～11 d內達造血重建 ,表明利妥昔單抗聯合APBSCT治療 CD20陽性NHL 是一種耐受及效果良好的方法。

2. 2　 曲妥珠單抗

曲妥珠單抗為一種針對 HER22/ neu的重組人源化 IgG單克隆抗體 ,能特異性識別 Her22調控的細胞表面蛋白 HER22 ,使其通過內吞噬作用離開胞膜進入核體內 ,抑制其介導的信號轉導 ,從而起到治療腫瘤的作用。美國 FDA 于 1999 年批準其上市 ,2002年在我國上市。大量臨床資料證實曲妥珠單用于乳腺癌的有效率為21 % ,而且它與化療聯合應用明顯提高了生存時間。據報道 ,歐洲曲妥珠單抗輔助治療試驗研究了曲妥珠單抗對 HER22 陽性伴有或不伴有淋巴結陽性的乳腺癌患者的療效 ,其中 1 組給予 1 年的曲妥珠單抗治療 ,另1組作為對照。曲妥珠單抗治療 1 年組與對照組相比 ,復發風險減少了46 % ,兩組的整體生存率無明顯區別 ,說明曲妥珠單抗用于治療輔助化療后的 HER22陽性乳腺癌患者 ,明顯延長了患者的無病生存期。我國也對曲妥珠進行了臨床研究 ,沈坤煒等對 42 例 Ⅱ～ ⅢA期浸潤性乳腺癌患者紫杉醇聯合曲妥珠單抗治療 24 周 ,結果單用新輔助化療組*緩解率為 26. 3 % ,在新輔助化療聯用曲妥珠單抗組為65. 2 % ,可見 ,對于 HER22 過表達的乳腺癌化療聯用曲妥珠單抗能顯著提高*緩解率。

2. 3　 阿倫珠單抗

阿倫珠單抗是人源化、 非結合型單抗 ,作用靶點為正常與異常B淋巴細胞的 CD52 抗原 ,CD52 廣泛分布于正常的 B淋巴細胞、 T淋巴細胞、 單核細胞、 巨噬細胞和B 淋巴細胞及T淋巴細胞瘤細胞表面 ,在慢性淋巴細胞白血病細胞表面尤為豐富。它與帶 CD52 的靶細胞結合后 ,通過宿主效應子的補體依賴性細胞毒性(CDC) 、 抗體依賴性細胞毒性(ADCC)和細胞凋亡等機制導致細胞死亡。阿倫珠單抗作為一種作用機制*的單克隆抗體 ,對源于B和 T細胞的各種惡性腫瘤具有很好的治療作用。

     英國科學家應用阿倫珠單抗和利妥昔單抗治療復發性淋巴瘤患者 ,結果總反應率為 52 % ,其中*緩解 8 % ,表明聯合使用阿倫珠單抗和利妥昔單抗是安全可行的。在其它 T細胞惡性腫瘤的治療中:對 22 例 Ⅲ～ Ⅳ期皮膚 T細胞淋巴瘤(蕈樣肉芽腫病和 Sezary綜合征)患者靜脈輸注阿倫珠 12周 ,結果顯示阿倫珠具有非常好的療效 ,總有效率達 55 %。其中 ,紅皮病患者總有效率達 69 % ,片狀斑或皮膚腫瘤患者達40 %。阿倫珠單抗聯合其他藥物、 化療等治療腫瘤具有顯著的效果。但臨床研究表明 ,其還存在一些常見并發癥 ,如低血壓、 寒顫、 發熱、 惡心、 嘔吐、 氣短、 支氣管痙攣、 皮疹、疲乏、 呼吸困難、 頭痛、 腹瀉、 感染等。

2. 4　 西妥昔單抗

西妥昔單抗為 IgG 1 單克隆抗體 ,是表皮生長因子受體拮抗劑 ,可與表達于正常細胞和多種腫瘤細胞表面的表皮生長因子受體( EGFR)特異性結合 ,并競爭性阻斷 EGF和其他配體 ,如α 2轉化生長因子(TGF 2 α)的結合。它通過增加細胞周期抑制因子 p27kip 使得細胞周期停留在 G 1 期;增加 Bax表達和減少 bcl22表達 ,誘導癌細胞的凋亡;它還可減少基質金屬蛋白酶和血管內皮生長因子(VEGF)的產生。相關實驗表明 ,西妥昔單抗可抑制過度表達 EGFR的腫瘤細胞的增殖 ,但是對缺乏 EGFR表達的腫瘤細胞則沒有抗腫瘤效果 ,還發現西妥昔與化療聯用要優于單獨化療。

在對西妥昔單抗聯合化療的研究中 ,BOAD 試驗zui為。576例晚期結直腸癌(ACRC)患者中 82 %的 EGFR 過表達。治療采取兩個方案 ,第1組用西妥昔單抗聯合伊立替康治療;第2組單獨用西妥昔單抗單藥治療。西妥昔單抗聯合伊立替康與單用西妥昔單抗相比 ,聯用療效優于單一使用 ,有效率分別為23 %和11 % ,疾病控制率為 56 %和 32 % ,疾病進展中位時間為4. 1和1. 5個月 ,中位生存時間為8. 6和6. 9個月 ,而且西妥昔單抗并沒有增加化療的副作用。以上臨床實驗顯示:西妥昔單抗能夠克服 ACRC患者對伊立替康的耐藥性 ,生存質量明顯提高。西妥昔單抗的毒副作用包括:痤瘡樣皮疹、 虛弱、 腹痛、 惡心、 嘔吐、 白細胞減少和過敏反應等。其中痤瘡樣皮疹是zui常見的不良反應 ,皮疹主要分布在臉部和軀干上部 ,這可能是由于西妥昔單抗干擾了 EGF的表皮生理作用所致。

2. 5　 貝伐單抗

貝伐單抗是抗VEGF的人源化單抗 ,主要通過中和VEGF來阻斷其與內皮細胞上的受體結合 ,使得腫瘤細胞不能得到養分和氧 ,起到治療腫瘤的作用。Presta 等將鼠抗人VEGF單克隆抗體(muMAB VEGF) A. 4. 6. 1 的互補決定區與人 IgG 1的恒定區框架嵌合 ,并對相應氨基酸殘基加以修飾 ,zui終形成了人鼠嵌合型 VEGF單抗 ,仍然有 7 %的氨基酸來源于鼠抗體。實驗表明 ,貝伐單抗用于治療腫瘤安全有效。鄭航等[12 ]探究貝伐單抗聯合伊立替康治療轉移性結腸癌的療效 ,90例患者中給予貝伐單抗聯合伊立替康治療的一組有效率為43. 3 % ,血清腫瘤標志物的濃度治療前后有顯著變化。這說明貝伐聯合伊立替康治療轉移性結腸癌具有更高的疾病控制率。2005 年美國臨床腫瘤學會年會上報道了貝伐單抗的研究結果 ,采用貝伐單抗聯合伊立替康和順鉑一線治療轉移性胃癌或者胃食管連接部腺癌的患者 ,治療的不良反應除了原有伊立替康和順鉑引起的腎髓抑制、 胃腸道反應等 ,還有貝伐單抗造成的不良反應包括栓塞性疾病、胃穿孔等。

3　 抗腫瘤單抗偶聯物

3. 1　 放射免疫偶聯物

放射免疫治療(RIT)是以單克隆抗體為載體 ,以放射性核素為彈頭 ,通過抗體特異性結合腫瘤細胞相關抗原 ,將產生高能射線的放射性核素靶向到腫瘤細胞 ,實現對腫瘤的近距離內照射治療。RIT利用攜帶放射性核素的單克隆抗體特異地結合到病灶部位 ,減少了對正常組織的損傷。90Y— ibri2tumomab是第1個被 FDA批準應用于臨床的放射免疫制劑 ,主要用于復發的淋巴瘤患者或對單獨應用利妥昔單抗療效不佳的患者。

3. 2　 免疫毒素

免疫毒素是用化學方法或基因工程方法將腫瘤選擇性單抗與經修飾的多肽毒素共價連接而成的腫瘤治療藥物。免疫毒素可與腫瘤細胞表面受體或與細胞表面的靶抗原相結合后內化 ,繼而在胞內抑制細胞蛋白質合成 ,導致腫瘤細胞死亡。毒素有很多種 ,如植物毒素、 細菌毒素、 動物毒素 , 其中引用zui廣泛的是植物毒素中的白喉毒素。美國 FDA已經批準了白喉毒素與白細胞介素 2 重組的免疫毒素 ONTAK(DAB3892I L2) ,用于治療人皮膚 T細胞淋巴瘤[13214 ]。

3. 3　 化學免疫偶聯物

單抗是藥物良好的靶向性載體 ,通過藥物分子上特殊的功能基團如:羥基、 巰基、 氨基等 ,將治療藥物與單抗相連接而組成化學免疫偶聯物 ,避免了藥物對其他正常組織的毒害作用,選擇性地發揮治療作用。常與單抗進行偶聯的藥物有阿霉素、 柔紅霉素、 平陽霉素、 博安霉素、 新制癌菌素、 氨甲喋呤等。

4　 單克隆抗體在其他疾病中的應用

單克隆抗體藥物不只在腫瘤的治療中取得了很好療效 ,在其他疾病的治療中也取得了一些療效 ,例如:奧馬珠單抗(omalizumab)通過與游離 IgE結合而顯著降低游離 IgE的水平 ,阻斷 IgE與肥大細胞、 嗜堿粒細胞結合 ,防止炎癥介質的釋放。可顯著改善哮喘病人的癥狀、 肺功能及生活質量 ,減少哮喘惡化的發作次數 ,減少糖皮質激素的用量 ,使用安全 ,具有很好的耐受性[15 ]。Mab03. 2C1C2 在體外能抑制白念珠菌芽管的形成 ,從而抑制白念珠菌對上皮細胞、 內皮細胞的粘附 ,降低白念珠菌的侵襲力。利妥昔單抗對類風濕和系統性紅斑狼瘡也有很好的治療作用。英夫利昔單抗對類風濕性關節炎患者疼痛、 晨僵、 關節腫脹等臨床癥狀減輕程度就可達60 %。另有研究顯示 ,輸注英夫利昔單抗可快速、 顯著緩解頑固性銀屑病、 關節炎病人的關節和皮損癥狀[16 ]。英利昔單抗對克羅恩病、 潰瘍性結腸炎、 酒精性肝病等消化系統疾病都有較好療效 ,且在推薦的治療范圍內安全性良好。

上海試劑銷售科技有限公司整理編輯！