牛血清的質量檢測
(一) 化學檢測
(1) 滲透壓(280-340mOsmol/kg):使用凝固點降低的方法檢測滲透壓,使用國家標準技術研究所標定的標準溶液對我們的滲透壓儀器進行校準;
(2) PH值(7.0-7.5):同樣使用國家標準技術研究所標定的標準溶液對pH計進行校準;
(3) 蛋白含量:(電容法)樣品被加到醋酸纖維素介質中并在緩沖溶液體系內遷移,條帶經染色、清潔、干燥后用密度儀進行掃描以檢測***和球蛋白組分的相對濃度。 ***、球蛋白和血紅蛋白隨著牛年齡的增加血清中總蛋白含量相應增加,總的血清蛋白含量可以確認產品的規格和年齡。
(二) 微生物檢查
(1)細菌和真菌:直接培養法
(2)支原體:(培養法及DNA染色法)在支原體專業培養基上培養3-4周,培養溫度34°C~36°C分別在需氧和厭氧的條件下進行,有的還需要在支原體瓊脂培養皿上傳4代,Hoechst熒光素DNA染色檢查哪些培養法無法檢出的支原體如豬鼻支原體等。
(3)病毒:牛蘭舌病毒Bovine blue tongue;牛腺病毒Bovine Adeovirus;牛細小病毒Bovine Parvovirus;牛病毒性腹瀉病毒Bovine Viral Diarhea Virus;狂犬病病毒Rabies;呼腸狐病毒Reovirus;牛呼吸道合胞病毒BRSV;副流感病毒III型Parainfluenza。 檢查方法:已證明無外源因子污染的牛細胞培養物,在細胞生長液中加15%待測血清,連傳3代共21天。陰性對照細胞培養液中價15%已知無病毒污染的牛血清,與試驗組同條件下進行。在觀察期內注意細胞形態變化或細胞病變。在觀察期內第14天待檢樣品和對照樣品用標準病毒檢測方法檢查。如待檢細胞培養物經胰酶消化后分種到6個含蓋玻片的容器內。陰性對照品按同樣方法。再將牛腹瀉病毒、牛細小病毒、牛腺病毒、狂犬病毒和呼腸弧病毒分別加入待檢培養物蓋玻片容器內作為陽性對照,在培養7天,用熒光抗體技術進行檢查。細胞病變或病毒引起的其他改變通過蘇木精或伊紅染色進行觀察。取另外一個待檢細胞培養瓶用人“O”紅細胞、豚鼠紅細胞和新鮮雞紅細胞作血球吸附病毒檢查。試驗在2-8°C和20-24°C進行。陰性對照細胞預先感染副流感III型病毒作為陽性對照。未能感染的細胞作為陰性對照。
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