人血小板裂解液替代胎牛血清大規(guī)模擴(kuò)增人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞

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摘要 

背景：目前國(guó)內(nèi)外大多數(shù)實(shí)驗(yàn)仍采用經(jīng)典的培養(yǎng)基和胎牛血清進(jìn)行臍帶間充質(zhì)

干細(xì)胞培養(yǎng)，血清培養(yǎng)潛在的不安全因素限制了未來(lái)臨床應(yīng)用的可行性。
 

目的：以人血小板裂解液替代胎牛血清培養(yǎng)、鑒定人間充質(zhì)干細(xì)胞，以期進(jìn)一

步應(yīng)用于臨床低密度擴(kuò)增人間充質(zhì)干細(xì)胞。
 

方法：人血小板裂解液通過(guò)反復(fù)凍融、離心、過(guò)濾、濃縮等方法制備。以IMDM

為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，添加5%濃縮血小板裂解液作為實(shí)驗(yàn)組培養(yǎng)基；以添加體積分?jǐn)?shù)

10%胎牛血清為對(duì)照組培養(yǎng)基。采用酶消化法分離培養(yǎng)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞，以

3 000/cm²的濃度進(jìn)行傳代培養(yǎng)，待細(xì)胞擴(kuò)增至P5代后，進(jìn)行細(xì)胞形態(tài)與直徑、

免疫表型、成骨成脂分化、克隆形成率等細(xì)胞生物學(xué)特性檢測(cè)，并比較兩者之

間的差別。
 

結(jié)果與結(jié)論：人血小板裂解液擴(kuò)增的臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞形態(tài)細(xì)長(zhǎng)，有更高的細(xì)

胞累積群倍數(shù)；克隆形成檢測(cè)結(jié)果顯示兩者形成的克隆效率差異無(wú)顯著性意義，

流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果顯示兩者有相似的細(xì)胞表型，體外誘導(dǎo)分化顯示兩者都具

有成骨、成脂分化能力，但人血小板裂解液擴(kuò)增的間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化能力

更強(qiáng)。提示人血小板裂解液可以取代胎牛血清用于臨床低密度擴(kuò)增人間充質(zhì)干

細(xì)胞。