：配培養基的時候調PH為7.25，分裝-20度保存，幾天后解凍再測為7.80，怎么回事啊，難不成每次配時得調到7以下嗎？解凍后重新調PH值，再過濾分裝，還能用嗎？還能－20度保存嗎？

答：看來你用的是粉末DMEM，說明書上說應該加3.7 g碳酸氫鈉，還說過濾的時候PH值升高0.1-0.2.但是3.7 g碳酸氫鈉對應的是10%的CO2培養環境，如果你用的是5%的CO2，那么你只要加入1.85 g碳酸氫鈉就行，我試過，這時候基本不用調節PH值，然后開始過濾，過濾的時候PH會上升，但基本上也是在要求的范圍。但是即使你只加1.85 g碳酸氫鈉，時間太長的話，PH值還是會上升，因為你裝配基的瓶子不是密封的，與空氣中的CO2有接觸，而空氣中的CO2得濃度是低于5%的，那么zui時間的延長，碳酸氫鈉緩沖對在起作用，PH值又上升了，這是不可避免的。當然可以加入HEPES，引入新的緩沖對，相對來說PH就不容易改變了。

我現在都不測PH值了，目測一下就差不多，只要是那種玫瑰紅色就是正常范圍，當你對著光發現有紫色的時候，肯定是PH又上升了，如果太紫的話就需要重新調節PH值了。如果僅僅是一般的紫色的話沒問題，你可以試試，把培養瓶拿入培養箱中，但一定要把瓶蓋擰松，這樣幾個小時后，你的配基的PH就恢復到正常水平了，因為這時候配基接觸到了5%的CO2。