成人做爰免费视频免费看_成人a级高清视频在线观看,成人a大片在线观看,成人a大片高清在线观看,成人av在线播放,一a一级片,一级黄 中国色 片,一级黄 色蝶 片,一级黄色 片生活片

產品推薦:氣相|液相|光譜|質譜|電化學|元素分析|水分測定儀|樣品前處理|試驗機|培養箱


化工儀器網>技術中心>工作原理>正文

歡迎聯系我

有什么可以幫您? 在線咨詢

大鼠海馬神經元的原代培養及細胞培養注意事項

來源:生物試劑銷售中心   2014年09月26日 14:06  

大鼠神經元細胞的原代培養

原代培養的細胞會不可避免地存留少量異質細胞一同生長.為了后續實驗結果的針對性和準確性,一般都需要對培養物進行純化。純化神經元的方法有很多種,zui簡便及常用的是采用有絲分裂抑制劑阿糖胞苷來抑制異質細胞的存活和生長。神經元的分化增殖完成于胚胎期,大部分神經元在出生后即為*的分裂后細胞,但其他細胞則仍然不斷地進行分裂增殖,

使用有絲分裂抑制劑后,非神經元的細胞生長會受到抑制及淘汰,神經元由此得到純化

實驗材料:Hanks液,DMEM培養基10ml,有刻度吸管兩只,彎頭吸管兩只,無刻度吸管一只,新生乳鼠(24小時)0.05%胰酶,1%雙抗,10%胎牛血清,培養皿,小燒杯,空的離心管,鑷子,剪刀,酒精燈,酒精棉,

實驗前準備工作:肥皂洗手,新吉爾滅擦手,開通風柜,將吸管從套筒中取出放入各自對應的試管內,將橡皮塞安裝到各自吸管上,酒精燈分別迅速灼燒,

1配液Hanks液近40ml1%雙抗1ml,加完雙抗的小吸管留作計數,在DMEM培養基中加10%胎牛血清(已配好,全部加入),從離心管取一滴碳酸氫鈉調節pH值至溶液呈紫色,一離心管0.05%胰酶,

2.取材。乳鼠新生24小時。

3,洗滌剪碎,在培養皿中加入少許Hanks液洗滌,將乳鼠頭部用酒精棉擦拭消毒,在乳鼠頭部位置剪一個工字型切口,將皮膚顱骨沿著切口依次剪開剝離,取出大腦組織,并去除乳鼠的血管腦膜,用彎頭吸管將Hanks液與剝離干凈的腦組織移走到另一個干凈的培養皿中,用彎頭吸管洗走洗液,彎頭吸管將含有腦組織的Hanks移入到小燒杯中剪碎,每個組織塊近似一立方毫米,靜置后洗走上面的Hanks液,(吸取Hanks液時勿將下面的組織塊洗走),同樣方法再用Hanks液洗滌一次

4.酶解,加一離心管0.05%胰酶,將上述小燒杯中的組織液移入空置的離心管中,37攝氏度水浴10分鐘,觀察組織塊是否變小,靜置2分鐘,使組織沉淀下來,棄掉上請胰酶后,加DMEM培養基(全部倒入)來中和胰酶,吹散組織液

5.離心1200轉每分鐘,離心5分鐘,棄掉上清液,沉淀后加Hanks液吹散重懸組織液,用同樣的轉速和時間在離心一次,加*培養基3-4mL吹散,靜置1分鐘,以便消化大塊組織

6.計數,取0.1ml離心后的細胞液加入苔盤藍染色,加樣搶加0.1微升與計數板計數,同時剩余細胞液加入培養瓶中進行培養接種,標注好組別和時間,培養細胞的名稱37攝氏度,二氧化碳培養箱中,下周實驗課觀察細胞培養情況。

7.計數結果:2.3×106 ml

注意事項:

  1. 實驗前保證乳鼠在冰塊內冰凍數分鐘,頭朝下將乳鼠插入冰塊內,
  2. 玻璃腦膜血管時動作要迅速,以免乳鼠蘇醒
  3. 酒精燈應放在離操作界面不遠處,保證其溫度
  4. 用彎頭吸管吸取Hanks液時手腕旋轉
  5. 第二遍在小燒杯中用Hanks液洗時,要保證上請洗干凈,否則胰酶濃度將會減低
  6. *次水浴加熱時唔超過10分鐘,以免胰酶對組織產生損傷
  7. 吹打時避免大力以及吹打出氣泡,氣泡會導
  8. 致細胞破裂。吹打頻率可與秒表同步以保證每次操作的穩定性和重復性。

免責聲明

  • 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
  • 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
  • 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發表之日起一周內與本網聯系,否則視為放棄相關權利。
企業未開通此功能
詳詢客服 : 0571-87858618
主站蜘蛛池模板: 欧美精品一区二区三区四区| 注意: 中文字幕 人妻| 日韩精品熟妇一区二区三区| 粉嫩小又紧水又多| 亚洲国产精品一区二区手机| 人人插人人射| 日本av片在线看| 在线播放三级黄色日韩av| 高H纯肉NP 弄潮NP男男| 国产精品亚洲欧美一区二区| 中国少妇BBWBBW牲交| 4480yy午夜私人影院| 99久久亚洲精品| 伦理片在线观看午夜伦理电影三级网| 免费的黄网站在线观看| caoporm国产精品视频免费| WWW免费刺激无码又爽又色视频| 99久久久无码国产精品AAA| 免费A片看黄网站WWW下载| 疯狂伦交1一6 小说| 亚洲AV国产精品无码精| 在线视频夫妻内射| 国产伦精品一区二区三区免费| 兰桂坊人成社区亚洲精品| 久久亚洲中文字幕精品一区| 国产精品久久久久久久黄湿| 无码粉嫩小泬无套在线观看A片| 欧美日韩国产一级视频| 51久久国产露脸精品国产| 国产三级精品三级在线专区| 51吃瓜今日吃瓜入口| 邪恶肉肉全彩色无遮盖无翼海贼王| 欧美亚洲福利| 99国产在线精品视频| 亚洲欧美日韩四区| 婷婷色色狠狠爱| 亚洲欧美在线中文字幕| 6080YYY午夜理论AA片| 日本理论片韩国理论片免费看| 亚洲AV成人精品网站在线播放| 日韩少妇一级片|