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微生物學技術(shù):紫外線滅菌實驗

來源:上海北諾生物科技有限公司   2014年08月14日 14:35  

標簽: 紫外線 滅菌

紫外線滅菌是用紫外線燈進行的,波長為200~300 nm 的紫外線都有殺菌能力,其中以260 nm 的殺菌力zui強。在波長一定的條件下,紫外線的殺菌效率與強度和時間的乘積成正比。紫外線殺菌機制主要是因為它誘導了胸腺嘧啶二聚體的形成,從而抑制了DNA的復制。

實驗方法

  • 紫外線滅菌
實驗方法原理由于輻射能使空氣中的氧電離成[O],再使O2氧化生成臭氧(O3)或使水(H2O)氧化生成過氧化氫(H2O2),O3和H2O2均有殺菌作用。紫外線穿透力不大,所以,只適用于無菌室、接種箱、手術(shù)室內(nèi)的空氣及物體表面的滅菌。紫外線燈距照射物以不超過1.2 m 為宜。
試劑、試劑盒

石炭酸 來蘇爾溶液 牛肉膏蛋白胨平皿

儀器、耗材

紫外線燈

實驗步驟

1.  單用紫外線照射


(1)在無菌室內(nèi)或在接種箱內(nèi)打開紫外線燈開關(guān),照射30分鐘,將開關(guān)關(guān)閉。


(2)將牛肉膏蛋白胨平皿蓋打開15分鐘,然后蓋上皿蓋,置37℃培養(yǎng)24小時。共做三套。


(3)檢查每個平皿上生長的菌落數(shù)。如果不超過4個,說明滅菌效果良好,否則,需延長照射時間或同時加強其他措施。


2.  化學消毒劑與紫外線照射結(jié)合使用

(1)在無菌室內(nèi),先噴灑3~5%的石炭酸溶液,再用紫外線燈照射15分鐘。


(2)無菌室內(nèi)的桌面、凳子用2~3%來蘇爾擦洗,再打開紫外線燈照射15分鐘。


(3)檢查滅菌效果。


由于紫外線對眼結(jié)膜及視神經(jīng)有損傷作用,對皮膚有刺激作用,所以,不能直視紫外線燈光,更不能在紫外線燈光下工作。

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