免疫組化問題及解決辦法

來源：上海士鋒生物科技有限公司 2014年07月07日 08:22

1、染色過強

原因	解決辦法
抗體的濃度過高或抗體孵育時間過長	降低抗體滴度（一般指濃縮性抗體）抗體孵育時間：室溫1小時或4℃過
孵育溫度過高，孵育溫度超過37℃	一般室溫20-28℃
DAB顯色時間過長或DAB濃度過高	顯色時間不能超過5-10分鐘，以顯微鏡下觀察為準

2、非特異性背景染色

3、染色弱

原因	解決辦法
抗體濃度過低，孵育時間過短	提高抗體濃度，孵育時間不能少于60分鐘
試劑超過有效使用期	及時更換試劑
操作中，滴加試劑時緩沖液未瀝干，致使試劑稀釋	每步滴加試劑前瀝干切片中多余的緩沖液（但防止切片干燥）
室溫太低，低于15℃	若室溫低于15度，要改放在37℃孵育箱孵育30-60分鐘（或4℃冰箱過）
蛋白封閉過度	封閉時間不要超過10分鐘

4、染色陰性

相關(guān)產(chǎn)品

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