細(xì)胞

D-Hanks液 牛血清 RPMI1640 雙抗 0.08%胰酶

凈化工作臺 離心機 恒溫水浴箱 冰箱 倒置相差顯微鏡 培養(yǎng)箱 吸管 培養(yǎng)瓶 吸頭 槍頭 24培養(yǎng)板 膠塞 微量加樣槍 紅血球計數(shù)板

1. 取生長狀態(tài)良好的細(xì)胞，采用一般傳代方法進行消化，制成細(xì)胞懸液。

2. 計數(shù)，地將細(xì)胞分別接種于21～30個大小一致的培養(yǎng)瓶內(nèi)或培養(yǎng)孔（以24孔培養(yǎng)板為宜），每瓶或孔細(xì)胞總數(shù)要求一致，加入培養(yǎng)液的量也要一致。

3. 每天或每隔一天取出3瓶（孔）細(xì)胞進行計數(shù)，計算均值。培養(yǎng)3～5 d 常要給未計數(shù)的細(xì)胞換液。

4.  以培養(yǎng)時間為橫軸，細(xì)胞數(shù)為縱軸（對數(shù)），描繪在半對數(shù)座標(biāo)紙上，連接成曲線后即成該細(xì)胞的生長曲線。

1.  細(xì)胞生長曲線雖然zui為常用，但有時其反映數(shù)值不夠，可有20～30%的誤差，需結(jié)合其它指標(biāo)進行分析。

2.  現(xiàn)在很多實驗室利用培養(yǎng)板采用MTT法進行生長曲線測定，較為簡便。

3.  標(biāo)準(zhǔn)的細(xì)胞生長曲線近似“S”形，一般在傳代后*天細(xì)胞數(shù)有所減少，再經(jīng)過幾天的潛伏適應(yīng)期，然后進入對數(shù)生長期，達(dá)到平臺期后生長穩(wěn)定，zui后到達(dá)衰老。

4.  在生長曲線上細(xì)胞數(shù)量增加1倍時間稱為細(xì)胞倍增時間，可以從曲線上換算出。