細胞技術(shù)專題：細胞劃痕實驗

來源：上海北諾生物科技有限公司 2014年02月18日 14:52

材料：

6孔板

marker筆

直尺

20微升槍頭（滅菌）

無血清培養(yǎng)基

PBS

準備：

所有能滅菌的器械都要滅菌，直尺和marker筆在操作前紫外照射30min（超凈臺內(nèi)）

流程：

1、先用marker筆在6孔板背后，用直尺比著，均勻地劃橫線，大約每隔0.5~1cm一道，橫穿過孔。每孔至少穿過5條線。

2、在空中加入約5X105個細胞，具體數(shù)量因細胞不同而不同，掌握為夜能鋪滿。

3、第二天用槍頭比著直尺，盡量垂直于背后的橫線劃痕，槍頭要垂直，不要傾斜。

4、用PBS洗細胞3次，去除劃下的細胞，加入無血清培養(yǎng)基。

5、放入37℃5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。按0、6、12、24小時取樣，拍照。

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