（一）多克隆抗體的概念 
抗原刺激機體，產生免疫學反應，由機體的漿細胞合成并分泌的與抗原有特異性結合能力的一組球蛋白，這就是免疫球蛋白，這種與抗原有特異性結合能力的免疫球蛋白就是抗體。 
抗原通常是由多個抗原決定簇組成的，由一種抗原決定簇刺激機體，由一個B淋巴細胞接受該抗原所產生的抗體稱之為單克隆抗體（Monclone antibody）。由多種抗原決定簇刺激機體，相應地就產生各種各樣的單克隆抗體，這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體，機體內所產生的抗體就是多克隆抗體；除了抗原決定簇的多樣性以外，同樣一類抗原決定簇，也可刺激機體產生IgG、IgM、IgA、IgE和IgD等五類抗體。 
（二）免疫動物 
供免疫用的動物主要是哺乳動物和禽類，常選擇家兔、綿羊、山羊、馬、騾和豚鼠及小鼠等。動物的選擇常根據抗體的用途和量來決定，也與抗原的性質有關。如要獲得大量的抗體，多采用大動物；如要是獲得直接標記診斷的抗體，則直接采用本動物；如要獲得間接的標記診斷用抗體，則必須用異源動物制備抗體；如果難以獲得的抗原，且抗體的需要量少，則可以采用純系小鼠制備；一般實驗室采用的抗體，多用兔和羊制備。 
免疫用的動物選擇適齡的健康雄性動物，雌性動物特別是妊娠動物用于制備免疫抗體則非常不合適，有時甚至不產生抗體。由于對免疫應答的個別差異，免疫時應同時選用數只動物進行免疫。 
抗原是多種多樣的，而且千差萬別。就其化學成分而言，有蛋白質抗原、類脂抗原、多糖類抗原和核酸抗原等。就抗原性而言，有*抗原和不*抗原。為了獲得較好的抗血清，是選用蛋白質抗原，如要制備用于篩選細菌表達的cdna文庫或免疫印跡的抗血清，選用可降解的蛋白質抗原。不同的抗原，其免疫原性的強弱均不相同，這種免疫原性的強弱取決于抗原的分子量、化學活性基團、立體結構、物理形狀和彌散速度等。 
抗原的免疫劑量是依照給予動物的種類、免疫周期以及所要求的抗體特性等不同而不同。劑量過低，不能引起足夠強的免疫刺激，免疫劑量過多，有可能引起免疫耐受。在一定的范圍內，抗體的效價是隨注射劑量的增加而增高。蛋白質抗原的免疫劑量比多糖類抗原寬。一般而言，小鼠的免疫劑量為50μg～400μg/次，大鼠為100μg～1 000μg/次，兔為200μg～1 000μg/次。加強計量為劑量的1/5～2/5。 
免疫劑量與注射途徑有關，一般而言，靜脈注射劑量大于皮下注射，而皮下注射又比掌內和跖內皮下注射劑量大，也可采用淋巴結內注射法。加佐劑比不加佐劑的注射劑量要小，對家兔而言，采用弗氏*佐劑，則需注射0.5mg～1mg/kg./次，如采用弗氏不*佐劑則注射劑量應大10倍以上。如要制備高度特異性的抗血清,可選用低劑量抗原短程免疫法。如需要獲得價的抗血清，宜采用大劑量長程免疫法。免疫周期長者，可少量多次。免疫周期短者，應大量少次。 
兩次注射的間隔時間應長短適宜,太短起不到再次反應的效果，太長則失去了前一次激發的敏感作用。一般間隔時間應為5~7天，加佐劑者應為2周左右。 
注射的Ig純度高，則一般不易引起過敏反應，如注射血清，即使是少量，在再次免疫時，極易引起過敏反應，所以一定要采取措施。 
（四）佐劑的應用 
對可溶性抗原而言，為了增強其免疫原性或改變免疫反應的類型、節約抗原等目的，常采用加佐劑的方法以刺激機體產生較強的免疫應答。 
1．佐劑的類型 目前實踐中常應用的佐劑有氫氧化鋁膠、明礬、弗氏佐劑、脂質體和石蠟油等。也有采用結合桿菌等分枝桿菌、白喉桿菌以及細小棒狀桿菌等。 
⑴ 弗氏不*佐劑（incomplete Freund’s adjuvant,IFA） 
羊毛脂 1 份 
石蠟油 5 份 
混合，高壓滅菌后保存。用時加熱融化，冷卻至50℃左右，加抗原進行乳化處理。 
⑵ 弗氏*佐劑（complete Freund’s adjuvant,CFA） 
弗氏不*佐劑 10ml 
卡介苗 10mg～200mg