（一）多克隆抗體的概念 
抗原刺激機體，產(chǎn)生免疫學反應(yīng)，由機體的漿細胞合成并分泌的與抗原有特異性結(jié)合能力的一組球蛋白，這就是免疫球蛋白，這種與抗原有特異性結(jié)合能力的免疫球蛋白就是抗體。 
抗原通常是由多個抗原決定簇組成的，由一種抗原決定簇刺激機體，由一個B淋巴細胞接受該抗原所產(chǎn)生的抗體稱之為單克隆抗體（Monclone antibody）。由多種抗原決定簇刺激機體，相應(yīng)地就產(chǎn)生各種各樣的單克隆抗體，這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體，機體內(nèi)所產(chǎn)生的抗體就是多克隆抗體；除了抗原決定簇的多樣性以外，同樣一類抗原決定簇，也可刺激機體產(chǎn)生IgG、IgM、IgA、IgE和IgD等五類抗體。 
（二）免疫動物 
供免疫用的動物主要是哺乳動物和禽類，常選擇家兔、綿羊、山羊、馬、騾和豚鼠及小鼠等。動物的選擇常根據(jù)抗體的用途和量來決定，也與抗原的性質(zhì)有關(guān)。如要獲得大量的抗體，多采用大動物；如要是獲得直接標記診斷的抗體，則直接采用本動物；如要獲得間接的標記診斷用抗體，則必須用異源動物制備抗體；如果難以獲得的抗原，且抗體的需要量少，則可以采用純系小鼠制備；一般實驗室采用的抗體，多用兔和羊制備。 
免疫用的動物選擇適齡的健康雄性動物，雌性動物特別是妊娠動物用于制備免疫抗體則非常不合適，有時甚至不產(chǎn)生抗體。由于對免疫應(yīng)答的個別差異，免疫時應(yīng)同時選用數(shù)只動物進行免疫。 
抗原是多種多樣的，而且千差萬別。就其化學成分而言，有蛋白質(zhì)抗原、類脂抗原、多糖類抗原和核酸抗原等。就抗原性而言，有*抗原和不*抗原。為了獲得較好的抗血清，是選用蛋白質(zhì)抗原，如要制備用于篩選細菌表達的cdna文庫或免疫印跡的抗血清，選用可降解的蛋白質(zhì)抗原。不同的抗原，其免疫原性的強弱均不相同，這種免疫原性的強弱取決于抗原的分子量、化學活性基團、立體結(jié)構(gòu)、物理形狀和彌散速度等。 
抗原的免疫劑量是依照給予動物的種類、免疫周期以及所要求的抗體特性等不同而不同。劑量過低，不能引起足夠強的免疫刺激，免疫劑量過多，有可能引起免疫耐受。在一定的范圍內(nèi)，抗體的效價是隨注射劑量的增加而增高。蛋白質(zhì)抗原的免疫劑量比多糖類抗原寬。一般而言，小鼠的免疫劑量為50μg～400μg/次，大鼠為100μg～1 000μg/次，兔為200μg～1 000μg/次。加強計量為劑量的1/5～2/5。 
免疫劑量與注射途徑有關(guān)，一般而言，靜脈注射劑量大于皮下注射，而皮下注射又比掌內(nèi)和跖內(nèi)皮下注射劑量大，也可采用淋巴結(jié)內(nèi)注射法。加佐劑比不加佐劑的注射劑量要小，對家兔而言，采用弗氏*佐劑，則需注射0.5mg～1mg/kg./次，如采用弗氏不*佐劑則注射劑量應(yīng)大10倍以上。如要制備高度特異性的抗血清,可選用低劑量抗原短程免疫法。如需要獲得價的抗血清，宜采用大劑量長程免疫法。免疫周期長者，可少量多次。免疫周期短者，應(yīng)大量少次。 
兩次注射的間隔時間應(yīng)長短適宜,太短起不到再次反應(yīng)的效果，太長則失去了前一次激發(fā)的敏感作用。一般間隔時間應(yīng)為5~7天，加佐劑者應(yīng)為2周左右。 
注射的Ig純度高，則一般不易引起過敏反應(yīng)，如注射血清，即使是少量，在再次免疫時，極易引起過敏反應(yīng)，所以一定要采取措施。 
（四）佐劑的應(yīng)用 
對可溶性抗原而言，為了增強其免疫原性或改變免疫反應(yīng)的類型、節(jié)約抗原等目的，常采用加佐劑的方法以刺激機體產(chǎn)生較強的免疫應(yīng)答。 
1．佐劑的類型 目前實踐中常應(yīng)用的佐劑有氫氧化鋁膠、明礬、弗氏佐劑、脂質(zhì)體和石蠟油等。也有采用結(jié)合桿菌等分枝桿菌、白喉桿菌以及細小棒狀桿菌等。 
⑴ 弗氏不*佐劑（incomplete Freund’s adjuvant,IFA） 
羊毛脂 1 份 
石蠟油 5 份 
混合，高壓滅菌后保存。用時加熱融化，冷卻至50℃左右，加抗原進行乳化處理。 
⑵ 弗氏*佐劑（complete Freund’s adjuvant,CFA） 
弗氏不*佐劑 10ml 
卡介苗 10mg～200mg