蛋白質(zhì)技術(shù)專題：血漿游離血紅蛋白測定

來源：上海北諾生物科技有限公司 2013年12月05日 16:15

實驗原理

血紅蛋白具有類過氧化物酶活性，可催化H2O2釋放新生態(tài)氧，使鄰甲聯(lián)苯胺氧化發(fā)生顏色變化，由無色zui終變?yōu)樗{(lán)紫色。根據(jù)顯色深淺與標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較，可測出其含量。

實驗方法

材料：

1．2g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液

2．1%H2O2

3．10%醋酸溶液

4．分光光度計

方法：

1.抽取靜脈血2-3ml，枸櫞酸鈉抗凝，離心分離血漿。

2．按下表進(jìn)行操作，用分光光度計，波長為530nm，以空白管調(diào)零，測定測定管的吸光度。

3.計算公式

血漿游離Hb（mg/L）=測定管吸光度/標(biāo)準(zhǔn)管吸光度×100

實驗結(jié)果計算

參考范圍：0-40mg/L

注意事項

1.一切容器避免血紅蛋白污染；

2.采血要順利，器皿要干燥，檢測血漿要新鮮，及時分離，防止人為溶血；

3.鄰聯(lián)苯胺溶液具致癌性，檢測時要小心，廢液要妥善處理，以免污染；

4.雙氧水要新鮮配置，濃度要準(zhǔn)確。

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