蛋白質的研究發展歷程
1.蛋白質鑒定:可以利用一維電泳和二維電泳并結合Western等技術,利用蛋白質芯片和抗體芯片及免疫共沉淀等技術對蛋白質進行鑒定研究。
2.翻譯后修飾:很多mRNA表達產生的蛋白質要經歷翻譯后修飾如磷酸化,糖基化,酶原激活等。翻譯后修飾是蛋白質調節功能的重要方式,因此對蛋白質翻譯后修飾的研究對闡明蛋白質的功能具有重要作用。
3.蛋白質功能確定:如分析酶活性和確定酶底物,細胞因子的生物分析/配基-受體結合分析??梢岳没蚯贸头戳x技術分析基因表達產物-蛋白質的功能。另外對蛋白質表達出來后在細胞內的定位研究也在一定程度上有助于蛋白質功能的了解。Clontech的熒光蛋白表達系統就是研究蛋白質在細胞內定位的一個很好的工具。
蛋白質生物合成
4.對人類而言,蛋白質組學的研究zui終要服務于人類的健康,主要指促進分子醫學的發展。如尋找藥物的靶分子。很多藥物本身就是蛋白質,而很多藥物的靶分子也是蛋白質。藥物也可以干預蛋白質-蛋白質相互作用。
在基礎醫學和疾病機理研究中,了解人不同發育、生長期和不同生理、病理條件下及不同細胞類型的基因表達的特點具有特別重要的意義。這些研究可能找到直接與特定生理或病理狀態相關的分子,進一步為設計作用于特定靶分子的藥物奠定基礎。
蛋白質組學研究的基本技術
對于蛋白質組學的研究來說,它的zui基本的實驗手段就是利用雙向凝膠電泳(two-dimensional protein electrophoresis, 2DE),在整個 基因組水平上檢測蛋白質表達的情況。雙向凝膠電泳首先利用等電點聚焦來分離不同等電點的蛋白,再利用SDS-PAGE來分離不同分子量的蛋白,其分辨率是非常高的。微克級的蛋白質就可以被很好的分辨開了,如在微克級水平上,有人從一個蛋白混合物中zui多分開了11200種蛋白質,數量是非??捎^的。因而,微克級的蛋白的雙向凝膠電泳常被用來初步檢測表達或修飾有變化的蛋白。然后,同樣的蛋白混合物樣品可用于毫克級的2DE,這樣,電泳圖譜上的每一個多肽就可被純化并進行下一步的分析,如質譜,末端或中間的氨基酸序列分析等。
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