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臨床考核血清盤的制備要求

來源:上海滬鼎生物科技有限公司   2013年04月24日 10:25  

 

 
ELISA試劑臨床考核血清盤的制備要求
 
 
    大鼠ELISA試劑盒的評(píng)價(jià)(evaluation)分兩個(gè)方面:一是試劑本身的質(zhì)量評(píng)價(jià),符合一定要求后才能生產(chǎn)供應(yīng);一是在臨床應(yīng)用中效果的評(píng)價(jià)。以肝炎ELISA診斷試劑為例,首先必須通過中國藥品生物制品檢定,以得到生產(chǎn)的許可。檢定內(nèi)容除包裝、標(biāo)簽、說明書等外,對試劑的性能,如特異性、靈敏度、精密度和線性等均需逐項(xiàng)檢定,通過對一系列參比品的檢測,結(jié)果符合要求者才為合格。ELISA試劑的臨床質(zhì)量評(píng)價(jià)是用該試劑對臨床樣本進(jìn)行檢測,以觀察其實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。臨檢中心對乙肝ELISA診斷試劑在這方面進(jìn)行了工作,通過質(zhì)量評(píng)價(jià),促進(jìn)了試劑質(zhì)量的提高。
    A 診斷試劑臨床質(zhì)量評(píng)價(jià)要點(diǎn)
  從臨床應(yīng)用角度考核檢驗(yàn)試劑的可靠性,是以其能否區(qū)分健康與疾病的能力作為依據(jù)的。目前還很難找到100%可靠的試驗(yàn),任何試驗(yàn)都會(huì)出現(xiàn)假陽性或假陰性。判斷試驗(yàn)的可靠性常以其靈敏度及特異性作為考核標(biāo)準(zhǔn)。臨床應(yīng)用的靈敏度用疾病患者試驗(yàn)陽性的百分率表示,特異性以無病者試驗(yàn)陰性的百分率表示。
  進(jìn)行這種評(píng)價(jià),首先需要收集有關(guān)的病人血清,然后用*的檢測該項(xiàng)標(biāo)志物zui可靠的試劑進(jìn)行測定,以確定其為陽性或陰性。
  這一組表明測定物為陽性或陰性的血清組成"血清盤"(panel)。被評(píng)價(jià)的試劑測定此血清所得結(jié)果與血清盤標(biāo)明的結(jié)果的關(guān)系如下表:
 
 
 
血清盤結(jié)果
合計(jì)
受檢試劑結(jié)果
a
b
a+b
c
d
c+d
 
合計(jì)
a+c
b+d
A+b+c+d
    表中a為真陽性,b為假陽性,c為假陰性,d為真陰性。
    被評(píng)價(jià)試劑的各項(xiàng)性能指標(biāo)按以下分式計(jì)算:
    靈敏度(%)=a/(a+c)×100%
    特異性(%)=b/(b+d)×100%
    符合率(%)=(a+d)/(a+b+c+d) ×100%
    一般認(rèn)為靈敏度或特異性>90%為良好。符合率是綜合靈敏度和特異性的指標(biāo)。
 
    B 臨床考核血清盤的制備要求
    1、 采用人的原血清;
    2、 血清盤應(yīng)具有相應(yīng)的穩(wěn)定性;
    3、 血清盤中樣本不含防腐劑,或只含極微量的、不影響檢驗(yàn)結(jié)果的防腐劑;
    4、 血清盤所包含的陰性樣本和陽性樣本約各占一半;
    5、 陽性樣本中,應(yīng)有一定數(shù)量的強(qiáng)陽性和弱陽性樣本;
    6、 血清盤中應(yīng)有一定數(shù)量的臨界值上、下含量的樣品,以檢驗(yàn)試劑的靈敏度。
    7、 血清盤中應(yīng)包含與該項(xiàng)檢驗(yàn)相關(guān)的病種樣本和已積知具有干擾物質(zhì)(RF因子)的樣本,以檢驗(yàn)試劑的特異性。
    C 臨床考核血清盤的建議
  以抗-HBc-IgM為例,部臨檢中心收集近百例臨床肝炎病人的樣本,經(jīng)美國abbott公司抗-HBc-IgM試劑反復(fù)檢驗(yàn)篩選。選出血清70份,其中陽性29份,陰性41份,組成抗-HBc-IgM臨床考核血清盤。在70份樣本中,除7份為無病歷的質(zhì)控血清外,抗-HBc-IgM陽性的22份樣本中含臨床診斷急性肝炎16例、慢性活動(dòng)性肝炎5例、重癥肝炎1例;抗-HBc-IgM陰性的40份樣本中,含臨床診斷慢性遷延性肝炎24例、急性肝炎例(均為恢復(fù)期采的血樣)、慢性活動(dòng)性肝炎8例(其中5例為恢復(fù)血樣)。
  因此,這套抗血清盤用于商品試劑的臨床考核,可以將臨床上乙肝急性期、慢性活動(dòng)期病人區(qū)分開,具有臨床診斷意義。
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