在選擇生長因子試劑盒時,需圍繞靈敏度、特異性和交叉反應三大核心指標,結合實驗需求與樣本類型進行綜合評估,具體選擇策略如下:
1.靈敏度:匹配檢測下限需求
靈敏度是試劑盒檢測低濃度生長因子的能力,以最小可檢測濃度(如<1pg/mL)或空白對照標準差3倍值為標準。例如,檢測血清中低豐度生長因子(如FGF19,檢測范圍7.5-240pg/mL)時,需選擇靈敏度<1pg/mL的試劑盒;若樣本濃度較高(如VEGF,檢測范圍4.7pg/mL-300pg/mL),可選擇靈敏度稍低但成本更優的產品。
2.特異性:規避非目標干擾
特異性指試劑盒僅識別目標生長因子的能力,需通過抗體類型與交叉反應評估。優先選擇單克隆抗體試劑盒(如HGF試劑盒交叉反應率<0.1%),避免與同家族蛋白(如EGF與TGFα)或血清干擾物(如異嗜性抗體)結合。若檢測物種非人源(如大鼠VEGF),需確認抗體與目標物種蛋白匹配,防止種屬交叉反應。
3.交叉反應:排除結構類似物干擾
交叉反應是試劑盒與非目標分子結合導致的假陽性,需通過說明書或臨床試驗報告確認。例如,TGF-β1試劑盒需明確不與胰島素原、LH等物質反應;IGF-1試劑盒需在膽紅素(200mg/L)、脂血(3000mg/dL)等干擾物存在時保持結果穩定。若樣本含高濃度鉤狀效應風險物質(如HGF>1000ng/mL),需選擇支持稀釋復測的試劑盒。
4.實驗需求與樣本類型適配
根據樣本類型(血清、血漿、細胞上清等)選擇兼容試劑盒。例如,細胞上清需離心去除顆粒后檢測;組織勻漿需用PBS稀釋并超聲破碎。若需高通量檢測,優先選擇96T規格試劑盒;若樣本量有限,可選擇48T規格以減少浪費。
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