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人白介素8（IL-8）試劑盒主要基于雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）原理，實(shí)現(xiàn)對樣本中IL-8的定量檢測。
試劑盒采用高親和力的酶標(biāo)板，預(yù)先包被特異性抗人IL-8抗體作為固相抗體。檢測時(shí)，將待測樣本或標(biāo)準(zhǔn)品加入酶標(biāo)板孔中，樣本中的IL-8會(huì)與固相抗體結(jié)合。經(jīng)過孵育后，加入生物素化的抗人IL-8檢測抗體，該抗體與結(jié)合在固相抗體上的IL-8特異性結(jié)合。隨后，加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素（SA-HRP），生物素與親和素特異性結(jié)合，形成固相抗體-人IL-8-生物素標(biāo)記抗體-SA-HRP的夾心復(fù)合物。
未結(jié)合的物質(zhì)通過洗滌步驟去除，之后加入顯色底物四甲基聯(lián)苯胺（TMB）。在辣根過氧化物酶的催化下，TMB發(fā)生酶促反應(yīng)，產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)。加入終止液后，藍(lán)色轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色。顏色的深淺與樣本中IL-8的濃度成正比。
使用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度值（OD值），結(jié)合預(yù)先繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)OD值即可計(jì)算出樣品中IL-8的濃度。該試劑盒具有高靈敏度和特異性，能夠準(zhǔn)確檢測樣本中微量的IL-8，在炎癥性疾病、腫瘤研究等領(lǐng)域具有重要的臨床應(yīng)用價(jià)值。操作過程中需嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件，確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。
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