過氧化氫酶是一種普遍存在于幾乎所有生物體內(nèi)的一種抗氧化酶,主要分布于植物的葉綠體、線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、動物的肝和紅細(xì)胞中。它是過氧化物酶體的標(biāo)志酶, 約占過氧化物酶體酶總量的40%。
過氧化氫酶是由四個多肽鏈組成的同源四聚體,每一個亞基含有超過500個氨基酸殘基,且每個亞基的活性位點都含有一個卟啉血紅素基團,用于催化過氧化氫的反應(yīng)。過氧化氫酶的最適pH接近7,最適溫度則因物種而異。
過氧化氫酶的主要作用是催化過氧化氫分解為水和氧氣,清除體內(nèi)的過氧化氫,從而使細(xì)胞免于遭受H2O2的毒害,是生物防御體系的關(guān)鍵酶之一,為機體提供了抗氧化防御機理。不同來源的酶有不同的結(jié)構(gòu),在不同組織中酶的活性水平也不同,過氧化氫在肝臟中分解速度比在腦或心臟等器官快,因為肝臟中的CAT含量水平高。
Abbkine過氧化氫酶活性分析試劑盒利用過氧化氫酶的過氧化物酶活性來進行測定。在合適濃度的H2O2存在的條件下,過氧化氫酶與甲醇反應(yīng),產(chǎn)生甲醛,生成的甲醛可以與顯色物反應(yīng),產(chǎn)物可以在540nm處測量吸光度,樣本中的過氧化氫酶活性與OD值成正比。
目前市面上大部分過氧化氫酶試劑盒是利用殘余的過氧化氫在過氧化物酶的催化下氧化生成有色底物,間接檢測過氧化氫酶活性,但此方法樣本中其他的過氧化物酶可能會干擾實驗結(jié)果,而且可能會由于過氧化氫不穩(wěn)定而導(dǎo)致標(biāo)準(zhǔn)曲線誤差。Abbkine過氧化氫酶 (CAT) 活性分析試劑盒具有優(yōu)勢,直接檢測酶活,測值更準(zhǔn)確,特異性更高。因為甲醇是過氧化氫酶的底物,其他過氧化物酶不能利用甲醇做底物,所以避免了干擾信號。
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