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影響ELISA試劑盒測定成果的解決辦法

來源:上海聯碩生物科技有限公司   2024年06月06日 16:12  

一、類風濕因子
人血清中IgM、IgG型類風濕因子(RF)能夠與ELISA系統中的捕獲抗體及酶符號二抗的FC段直接結合,然后導致假陽性。
解決辦法:
1.用F(ab)2替代完好的IgG;
2.標本用聯有熱變性(63℃,10 min)IgG的固相吸附劑處理(將熱變性IgG加入到標本稀釋液中同樣有用);
3.檢測抗原時,能夠用2-巰基yi醇等加入到標本稀釋液中,使RF降解。
二、補體
ELISA系統中固相一抗和符號二抗過程中,抗體分子發作變構,其FC段的補體C1q分子結合位點被暴露出來,使C1q 能夠將二者連接起來,然后形成假陽性。
解決辦法:
1.用EDTA稀釋標本;
2.用53℃,10 min或56℃,30 min加熱血清使C1q滅活。
三、嗜異性抗體
人類血清中含有能與嚙齒類動物(如鼠等)Ig(s) 結合的天然嗜異性抗體,可將ELISA系統中一抗和二抗連接起來,也能形成假陽性。
解決辦法:
可在標本稀釋液中加入過量的動物Ig(s),但加入量不足或亞類不同時無效。
四、嗜靶抗原的本身抗體
抗甲狀腺球蛋白、抗胰島素等嗜靶抗原的本身抗體,有時能與靶抗原結合形成復合物,在ELISA方法中均可干擾抗原抗體測定成果。
解決辦法:
測定前需用理化方法將其解離后再測定。

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