GM17940細胞,人骨骼肌成肌細胞
組成部分:細胞 T25瓶 細胞數(shù)量1-3百萬級別+說明書
生長特性:貼壁生長
培養(yǎng)條件:培養(yǎng)基:90% DMEM培養(yǎng)基+10% 特級胎牛血清
氣相:空氣95%,二氧化碳5%
溫度:37℃
GM17940細胞,人骨骼肌成肌細胞 操作步驟:
1.用75%酒精噴灑整個瓶消毒,將其平躺置于培養(yǎng)箱中進行2-3小時的緩沖,.然后置于無菌操作臺,打開瓶口,將其中的培養(yǎng)液去掉,再往其中加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基并置于細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),根據(jù)細胞生長狀況及培養(yǎng)基顏色變化對其進行換液以及傳代;
2.待細胞長滿瓶底面積80%-90%,需要對其進行傳代,第一次傳代比例為1:2。
3傳代步驟:將0.25%含EDTA胰酶置于37°預(yù)熱,倒掉培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,往培養(yǎng)瓶中加入1mlPBS,輕晃洗滌后棄去。往瓶中加1ml預(yù)熱好的胰酶,置于37°孵育消化(第一次消化需時常取出置于顯微鏡下觀察,以顯微鏡下細胞觸角回收變圓、輕拍瓶壁見細胞脫落為消化時間,記錄消化時間,以便于下次消化),消化好后加入1ml培養(yǎng)基終止消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細胞,使之脫落,然后收集細胞懸液,1200rpm離心3min,棄上清,加入培養(yǎng)基重懸細胞,進行傳代。
注意事項:
1 收到細胞后首先觀察T-25瓶是否有損壞、漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2 瓶中運輸?shù)呐囵B(yǎng)液不能重復(fù)使用,請換新鮮培養(yǎng)液培養(yǎng)
3 對于貼壁細胞,若大部分細胞漂浮,置于培養(yǎng)箱隔夜觀察,大部分漂浮細胞重新貼壁,表明細胞活力正常,繼續(xù)培養(yǎng),剩余漂浮的細胞可以去掉;若大部分細胞仍然不貼壁,將漂浮的細胞離心收集,用臺盼藍染色鑒定細胞活力,并與本公司銷售人員及時聯(lián)系。
4 建議客戶收到細胞后不同倍鏡各拍幾張細胞的照片,記錄細胞狀態(tài),如細胞狀態(tài)出現(xiàn)問題請于72h內(nèi)與本公司銷售聯(lián)系,以便于更好的幫您解決問題,超過時間我段,本公司則默認細胞狀態(tài)良好,不免費對后續(xù)細胞狀態(tài)問題進行售后。
5 因細胞產(chǎn)品的特殊性,如客戶對本公司細胞質(zhì)量存有疑問,請于收到細胞后兩個月內(nèi)與本公司銷售聯(lián)系,超過時間段,本公司則默認細胞質(zhì)量優(yōu)良,不承擔(dān)因細胞產(chǎn)生的任何責(zé)任。
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