皮質(zhì)醇ELISA試劑盒是可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)工作量以及難易程度，再采用不同的標(biāo)本和操作方法的，對(duì)該試劑盒加入終止液的，得避免起泡，導(dǎo)致液體造成假陽性的，終止液加入后就輕輕的放下。使終止液與板孔內(nèi)溶液充分混勻；酶標(biāo)板讀數(shù)前，應(yīng)輕輕拭去板底的水跡和污物，保證板底干潔，以免影響讀數(shù)；應(yīng)根據(jù)底物液選擇合適的讀數(shù)波長(zhǎng)，如TMB一般選擇450nm波長(zhǎng)，PNPP一般選擇405nm波長(zhǎng)等；加入終止液后，應(yīng)盡快讀板，酶標(biāo)板內(nèi)顏色會(huì)隨著終止時(shí)間的延長(zhǎng)而變淡。

該試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，預(yù)先被皮質(zhì)醇捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的皮質(zhì)醇呈正相關(guān)。需要用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度，計(jì)算樣品濃度。

皮質(zhì)醇ELISA試劑盒應(yīng)嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。預(yù)處理后的樣本無需稀釋，直接取10μL加樣即可。皮質(zhì)醇ELISA試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶，這屬于正常現(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶溶解后再使用。如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

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