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無(wú)血清凍存液的廠(chǎng)家為您講解細(xì)胞凍存步驟和復(fù)蘇步驟
無(wú)血清細(xì)胞凍存液，通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株（腫瘤細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞），凍存細(xì)胞可在-80℃長(zhǎng)期保存（>5 年）。該凍存液含 DMSO、葡萄糖等各種細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)成分，提高細(xì)胞存活率和活力，亦適合于無(wú)血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞。
細(xì)胞凍存步驟：
1、 常規(guī)方法收集對(duì)數(shù)期的貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞于試管中。
2、 根據(jù)培養(yǎng)細(xì)胞的密度和凍存管的大小確定所需凍存細(xì)胞數(shù)。
3、 將所需數(shù)目的細(xì)胞懸浮液置于離心管中，1000rmp，5 分鐘離心收集培養(yǎng)細(xì)胞沉淀，*棄去離心管中的上清液。
4、 加入適量的Cell Freezing Medium 細(xì)胞凍存液于離心管中，使細(xì)胞濃度約為 5×105-1×107/ml。輕柔地混勻細(xì)胞，制成細(xì)胞混合液。
5、 將離心管中的細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)記的凍存管中，建議每管 1ml 或 1.5ml。
6、 直接將分裝好的細(xì)胞凍存管放入-80℃超低溫冰箱中，可長(zhǎng)期冷凍保存。
7、 如果想液氮中長(zhǎng)期保存，需先放入-80℃冰箱至少一天時(shí)間，方可移至液氮罐中保存。
凍存細(xì)胞復(fù)蘇步驟：
從冰箱中取出凍存的細(xì)胞，立即放入 37℃水浴槽中快速解凍。
待凍存管中細(xì)胞混合液*融化后，立即加入 1ml 細(xì)胞培養(yǎng)基于冷凍管中與細(xì)胞混合，加入適量的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)基，使用移液管緩緩加入到細(xì)胞沉淀，輕柔地混勻，將細(xì)胞混合液移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)容器中。
鏡檢細(xì)胞后，可根據(jù)各自研究的需要和方法經(jīng)行細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)。
以上僅供參考，希望對(duì)您有所幫助哦！
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