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(DHA)對大鼠骨關節炎動物模型(OA)關節軟骨組織退變的影響

來源:吉奧藍圖(廣東)生命科學技術中心   2023年07月25日 09:34  

  摘要
  骨關節炎模型,動物模型,構建動物模型實驗,動物造模,大鼠模型,模型大鼠
  骨關節炎(osteoarthritis, OA)是一種關節慢性退行性疾病,主要臨床癥狀為關節疼痛、僵硬、畸形和功能障礙。
  OA通常發生于老年人,研究表明超過一半的65歲以上老年人都有癥狀性或影像學上的OAP。OA會導致患者肢體殘疾和生活質量嚴重下降,其主要治療方式包括減少關節負重、藥物治療、物理治療和手術治療。
  二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)是一種n-3多不飽和脂肪酸,與二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid, EPA)相同,不飽和雙鍵起始于甲基端的第3個碳原子上。DHA和EPA的天然來源主要是海洋動物,如貝類、甲殼類、魚類,特別是鰭、鮭、鯡、沙丁魚等,是飲食中重要的營養物質。
  研究發現,DHA對多個系統具有廣泛而明確的抗炎作用,并應用于包括心血管疾病、炎癥性腸病、肥胖、糖尿病、非酒精性脂肪肝等多種炎癥性疾病的實驗動物模型和臨床試驗中。但目前DHA對OA炎癥反應的抑制活性及其對關節軟骨的保護能力尚不清楚。
  本研究在體外實驗中,利用大鼠OA模型測定DHA對OA關節軟骨的影響,并測定細胞凋亡、自噬及炎癥相關蛋白的表達,以了解DHA對OA關節軟骨的影響及機制。
  目的
  研究二十二碳六烯酸(DHA)對大鼠骨關節炎(OA)關節軟骨組織退變的影響,并初步探討其機制。
  方法
  手術切除內側半月板、切斷前交叉韌帶構建大鼠OA動物模型,并采用富含DHA的飼料喂養;同時采用假手術或正常飼料喂養進行對照。HE染色、甲苯胺藍染色、番紅O-固綠染色觀察關節軟骨組織退變程度,采用改良Mankin評分評價番紅O-固綠染色標本關節軟骨組織損傷;采用免疫組織化學染色法檢測關節軟骨組織中Ⅱ型膠原的表達;采用蛋白印跡法檢測關節軟骨組織中哺乳動物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、基質金屬蛋白酶13(MMP-13)、Beclin-1及通路蛋白磷酸化細胞外信號調節激酶(p-ERK)、磷酸化氨基末端蛋白激酶(p-JNK)、磷酸化p38蛋白(p-p38)的表達;microCT觀察軟骨下骨的結構變化。
  結果
  口服DHA減輕OA大鼠關節軟骨退變程度,并顯著降低Mankin評分;免疫組織化學染色結果顯示DHA可提高軟骨細胞Ⅱ型膠原陽性表達率;蛋白印跡法檢測結果顯示DHA可減少關節軟骨組織中mTOR和MMP-13的表達,并增加Beclin-1的表達;microCT顯示DHA可改善骨小梁微細結構,減少軟骨下骨囊變及硬化;通路蛋白檢測顯示DHA可顯著抑制p-p38的表達。

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  結論
  DHA可有效減輕OA大鼠關節軟骨退變及損傷,并改善軟骨下骨微細結構。這一作用通過增加軟骨細胞Ⅱ型膠原和Beclin-1的表達,并降低mTOR和MMP-13的表達而實現。DHA的作用機制為抑制p38通路。

 

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