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關(guān)于elisa實(shí)驗(yàn)問題的解決方法及建議

來源:上海白益生物科技有限公司   2022年06月28日 09:43  

  由于實(shí)驗(yàn)過分嚴(yán)謹(jǐn),出現(xiàn)一些可控亦或不可控的因素,會對于實(shí)驗(yàn)造成一些影響,也會導(dǎo)致一些問題的出現(xiàn)。對于實(shí)驗(yàn)中可能出現(xiàn)的一些情況或者問題,我司有一些小小的建議及方案:


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1. 加入反應(yīng)終止液后,沒有吸光值或吸光值偏低?

原因:未加入酶標(biāo)記物。

解決辦法:請按照操作步驟進(jìn)行。

原因:試劑盒內(nèi)容物未能充分回。

解決辦法:確定試劑盒內(nèi)容物回溫后再進(jìn)行操作。

原因:室溫太低。

解決辦法:若室溫太低(<19),請于操作步驟4,適當(dāng)延長溫育時間。

原因:未使用試劑盒的清洗液清洗。

解決辦法: 請用試劑盒內(nèi)所提供的清洗液清洗。

原因:試劑盒已過有效期限。

解決辦法:請更換成仍在有效期限內(nèi)的試劑盒。

2. 標(biāo)準(zhǔn)曲線線性不佳,或是平行性不好?

原因:溫育位置避光不好或受到氣流干擾。

解決辦法: 請確認(rèn)溫育位置既不透光也不透風(fēng)(如抽屜內(nèi))

原因:操作時間拖太久。

解決辦法:請?jiān)诜椒ㄊ炀毢笤龠M(jìn)行操作。

原因:微孔間相互污染。

解決辦法: 加樣品時,請小心勿濺出微孔外,以免造成其它微孔的污染。

原因:標(biāo)準(zhǔn)品或酶標(biāo)記物所加入的量不一致。

解決辦法:請使用已校正過的移液槍,并確保其與吸頭之間有高度密合性。

原因:添加樣品或試劑的操作方法不正確。

解決辦法:加樣品或試劑時,吸頭請勿接觸微孔。

原因:洗板過程發(fā)生問題(如管路堵塞、洗完板后未立刻進(jìn)行下一步驟)

解決辦法:請隨時監(jiān)控洗板機(jī)洗板過程,洗完后立即進(jìn)行下一步驟。

3. 吸光值均偏高(或線性不夠陡)?

原因:室溫太高(>25)

解決辦法: 若無法降低室內(nèi)溫度,請適當(dāng)縮短步驟4的溫育時間。

原因:底物溶液受到污染。

解決辦法: 若發(fā)現(xiàn)底物溶液已呈現(xiàn)淡藍(lán)色,請不要再使用。

原因:反應(yīng)時間超過太久。

解決辦法:請控制反應(yīng)時間。

原因:酶標(biāo)記物污染了盒內(nèi)其它試劑。

解決辦法:使用過的吸頭應(yīng)立即丟棄,可避免試劑間相互污染,凡是試劑(特別是酶標(biāo)記物與底物溶液)接觸過的容器應(yīng)立即清洗干凈。(先以漂白水浸泡,再以清水沖洗干凈,可確保無殘留)

4. 陰性標(biāo)準(zhǔn)品的吸光值低于陽性標(biāo)準(zhǔn)品的吸光值。

原因:微孔中的試劑未能充分混合。

解決辦法: 試劑加完后,需輕敲盤四周使其充分混合均勻。

原因:洗板過程發(fā)生問題(如管路堵塞、洗完板后未立刻進(jìn)行下一步驟.)

解決辦法:請隨時監(jiān)控洗板機(jī)洗板過程,洗完后立即進(jìn)行下一步驟。

原因:添加樣品或酶標(biāo)記物的量不一致。

解決辦法: 請使用已校正過的移液槍,并確保其與吸頭之間有高度密合性。


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