L1210細胞|L1210/DDP小鼠白血病順鉑耐藥株培養步驟

【背景資料】 見細胞說明書
【產品來源】 細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國內外著名大學建系
"公司提供貼壁、半貼壁、懸浮、半懸浮、貼壁與懸浮混合等細胞特性，一般細胞培養PBS量是10%，如果出現細胞狀態不良情況，可以提高PBS量到15%，SHEE人永生化食管上皮細胞待細胞穩定后，調回PBS量10%，對于初次實驗者，一般細胞培養，都需要加入雙抗防止細胞污染，細胞匯合度達到90%，我們開始寄送，這樣可以保持細胞收到時，良好的細胞活力。
一、售前
         上海琛藝實業專業為國內科研提供高品質細胞和優質服務，QC檢測合格后發貨保證細胞狀態良好，發貨前保證質量。
 
二、售后
         收到細胞7天內出現狀態不佳等情況請及時反饋，會有技術同步指導操作協助解決，如仍未養活免費重發。建議及時保種，有備無患！
 
三、細胞生長條件：
培養條件   
GIBCO(培養基90% +10%FBS)
溫度                   
                    37℃
空氣條件  
5% CO2，,95% AIR
傳代方法
1:2傳代，2~3天換液
凍存條件
90%FBS+10%DMSO
 
四、細胞收到后處理
    細胞在培養瓶中培養至良好狀態后灌滿*培養液并封好瓶口是細胞運輸的好辦法。收到細胞回到自己的實驗室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內，嚴格無菌操作。鏡下觀察：未超過80%匯合度時，可將瓶裝的*培養液移入廢液缸中，原瓶（T25瓶）保留6-8ml*培養液，懸浮細胞需離心處理，放入37℃、5%CO2孵箱培養；超過80%匯合度時，根據情況傳代或者凍存，具體操作見細胞培養步驟。

本公司生產的小鼠甲狀腺濾泡上皮細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過上皮細胞培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；細胞經PCK/TG免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

參數規格

1） 來源：甲狀腺

2） 形態：上皮細胞樣

3） 含量：>1x106 個/mL

4） 污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

5） 規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

產品相冊

可選擇干冰運輸及發送復蘇存活細胞方式：

（1）干冰運輸，收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇；

（2）存活細胞，收到后應繼續生長，傳代達到細胞生長狀態良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。

（3）收到細胞后請拍照，3天內如果發現污染，請及時拍照與我們聯系。

用途：僅供科研使用。

L1210細胞|L1210/DDP小鼠白血病順鉑耐藥株培養步驟

小鼠胚胎干細胞接收后的處理：

1） 收到細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發給我們。

2） 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。

3） 棄去T25瓶中的培養基，添加6ml新的*培養基。

4） 如果細胞長滿（90%以上）請及時進行細胞傳代。

5） 接到細胞次日，請檢查細胞是否污染，若發現污染或疑似污染，請及時與我們取得聯系。

 細胞培養步驟

一．培養基及培養凍存條件準備：

1） 準備L-15培養基；優質胎牛血清，10%；雙抗，1%。

2） 培養條件： 氣相：空氣，100%。 溫度：37攝氏度。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。

A。僅供研究之用。

運輸保存：采用干冰保存運輸。收到細胞時，若干冰已經*融化，請立即將細胞復蘇培養；若尚留有干冰，請立即將細胞放入液氮中保存待用，請按條件貯存細胞，切不可將細胞置于高溫環境。

OSKM-1小鼠誘導型多能干細胞一般培養方法:

1、組織塊培養法

A）按照前述方法取材，將組織剪成或切成1mm3大小的小塊，并加入少許培養基使組織濕潤。

B）將小塊均勻涂布于瓶壁，每小塊間距0.2 cm～12.5px，一般在25mL培養瓶（底面積為437.5px2）可接種20～30小塊為宜，小塊放置后，輕輕翻轉培養瓶，使瓶底朝上，然后于瓶內加入適量培養基蓋好瓶塞，將瓶傾斜放置在37℃溫箱內。

C）培養2～4小時，待小塊貼附后，將培養瓶緩慢翻轉平放，靜置培養，動作要輕，嚴禁搖動和來回振蕩，以防小鼠誘導型多能干細胞由于沖動而使小塊漂起而造成培養失敗，若組織塊 不易貼壁可預先在瓶壁涂一薄層血清、胎汁或鼠尾膠原等。開始培養時培養基不宜多，以保持組織塊濕潤即可，培養24小時后再補液，培養初期移動和觀察時要輕 拿輕放，開始幾天盡量不去搬動，以利貼壁和生長，培養3～5天時可換液，一方面補充營養，一方面去除代謝產物和漂浮小塊所產生的毒性作用。

2、消化培養法

該方法是采用前述的消化分散法，將妨礙細胞生長的細胞間質（包括基質、纖維等）去除，使細胞分散形成細胞懸液，然后分瓶培養。

3、懸浮細胞培養法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。