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Eca-109-GFP人食管癌綠色標記細胞|Eca-109細胞

來源:上海琛藝實業(yè)有限公司   2020年09月18日 16:13  

Eca-109-GFP人食管癌綠色標記細胞|Eca-109細胞 含STR鑒定
【背景資料】 見細胞說明書
【產(chǎn)品來源】 細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國內(nèi)外著名大學建系
"公司提供貼壁、半貼壁啊、懸浮、半懸浮、貼壁與懸浮混合等細胞特性,一般細胞培養(yǎng)PBS量是10%,如果出現(xiàn)細胞狀態(tài)不良情況,可以提高PBS量到15%,SHEE人永生化食管上皮細胞待細胞穩(wěn)定后,調(diào)回PBS量10%,對于初次實驗者,一般細胞培養(yǎng),都需要加入雙抗防止細胞污染,細胞匯合度達到90%,我們開始寄送,這樣可以保持細胞收到時,良好的細胞活力。
Eca-109-GFP人食管癌綠色標記細胞|Eca-109細胞
一、售前
         上海琛藝實業(yè)專業(yè)為國內(nèi)科研提供高品質(zhì)細胞和優(yōu)質(zhì)服務,QC檢測合格后發(fā)貨保證細胞狀態(tài)良好,發(fā)貨前保證質(zhì)量。
 
二、售后
         收到細胞7天內(nèi)出現(xiàn)狀態(tài)不佳等情況請及時反饋,會有技術(shù)同步指導操作協(xié)助解決,如仍未養(yǎng)活免費重發(fā)。建議及時保種,有備無患!
 
三、細胞生長條件:
培養(yǎng)條件   
GIBCO(培養(yǎng)基90% +10%FBS)
溫度                   
                    37℃
空氣條件  
5% CO2,,95% AIR
傳代方法
1:2傳代,2~3天換液
凍存條件
90%FBS+10%DMSO
 
四、細胞收到后處理
    細胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿*培養(yǎng)液并封好瓶口是細胞運輸?shù)暮棉k法。收到細胞回到自己的實驗室后,先打開外包裝,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內(nèi),嚴格無菌操作。鏡下觀察:未超過80%匯合度時,可將瓶裝的*培養(yǎng)液移入廢液缸中,原瓶(T25瓶)保留6-8ml*培養(yǎng)液,懸浮細胞需離心處理,放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng);超過80%匯合度時,根據(jù)情況傳代或者凍存,具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。
SW620-LUC人結(jié)腸癌熒光素酶標記細胞 處理方法
 
五、細胞培養(yǎng)步驟
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中,加入約6ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
 
1、貼壁細胞,傳代參考如下:
①. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
②. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
③. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
 
④. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。操作步驟:
請收到細胞后,在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。
(一)如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。
(二) (二)如果細胞已長滿,即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:
1.棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2.加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預熱,之后翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶10-30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加*培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出一半,分到新的培養(yǎng)瓶中。
如果沒有特別說明,收到細胞后的*次傳代一般是一傳二。
其他細胞如下:
293-LUC(HEK293-LUC)人胚腎細胞-熒光素酶標記
293-GFP(HEK293-GFP)人胚腎細胞-綠色標記
A549-LUC肺腺癌-熒光素酶標記
Bel-7402-GFP人肝癌細胞-綠色標記
C918-GFP人眼脈絡黑色素瘤細胞-綠色標記
CT26.WT-LUC小鼠結(jié)腸癌細胞-熒光素酶標記
CT26.WT-GFP小鼠結(jié)腸癌細胞-綠色標記
hct116/L-LUC人結(jié)腸癌耐奧沙利鉑細胞株-熒光素酶標記
hct116/L-GFP人結(jié)腸癌耐奧沙利鉑細胞株-綠色標記
HCT-116-LUC低分化結(jié)腸腺癌-熒光素酶標記
HCT-116-GFP低分化結(jié)腸腺癌-綠色標記
Hep3B-GFP人肝癌-綠色標記
LLC-LUC小鼠肺癌細胞-熒光素酶標記
LLC-GFP小鼠肺癌細胞-綠色標記
SGC-7901-GFP人胃癌細胞-綠色標記
SMMC-7721-GFP人肝癌細胞-綠色標記
SW620-LUC人結(jié)腸癌細胞-熒光素酶標記
SW620-GFP人結(jié)腸癌細胞-綠色標記
ARPE19-GFP人視網(wǎng)膜上皮細胞-綠色標記

 

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