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LLC細胞|LLC-LUC小鼠肺癌熒光素酶標記細胞 處理方法

來源:上海琛藝實業有限公司   2020年07月12日 14:06  

上海琛藝實業有限公司經過數年的努力發展已迅速成為集產品研發、生產、經營為一體的專業化生物工程公司。公司新引進細胞上千株,其中人的已通過STR鑒定的有幾百株,歡迎各位選購。。。。。。

 

產品名稱:LLC細胞|LLC-LUC小鼠肺癌熒光素酶標記細胞 處理方法  含STR鑒定

包裝:內層無菌自封袋;防壓泡沫盒;外層防壓保溫氣泡袋;說明書
細胞來源:ATCC、sciencell、ICLC
貨期:1-2周
運輸方式:快遞運輸
售后:收到細胞后12天,如發現細胞有質量問題(如污染,死亡,快遞運輸等原因)時,應出具書面質量問題報告并及時通知銷售人員,我們將盡快為您解決!

  • Hepa 1-6細胞 Hepa 1-6小鼠肝癌細胞
  • 三、細胞生長條件:

 

  • 組成:

組份

數目

細胞

 1 T-25瓶

細胞說明書

一份

  • 細胞簡介:

生長特性:

貼壁生長

 

細胞來源:

從ATCC/中科院/協和醫院等地引進

培養條件

培養基:1640 +10%FBS(推薦德國BI 04-002-1A

優等胎牛血清)

氣相:空氣95%,二氧化碳5%

溫度:37℃

培養:

  • 貼壁細胞

1.用75%酒精噴灑整個瓶消毒,將其平躺置于培養箱中進行2-3小時的緩沖,.然后置于無菌操作臺,打開瓶口,將其中的培養液去掉,再往其中加入5-6mL新鮮培養基并置于細胞培養箱中培養,根據細胞生長狀況及培養基顏色變化對其進行換液以及傳代;

2.待細胞長滿瓶底面積80%-90%,需要對其進行傳代,di一次傳代比例為1:2。

3傳代步驟:將0.25%含EDTA胰酶置于37°預熱,倒掉培養瓶中的培養基,往培養瓶中加入1mlPBS,輕晃洗滌后棄去。往瓶中加1ml預熱好的胰酶,置于37°孵育消化(di一次消化需時常取出置于顯微鏡下觀察,以顯微鏡下細胞觸角回收變圓、輕拍瓶壁見細胞脫落為佳消化時間,記錄佳消化時間,以便于下次消化),消化好后加入1ml*培養基終止消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細胞,使之*脫落,然后收集細胞懸液,1200rpm離心3min,棄上清,加入*培養基重懸細胞,進行傳代。

 

二、懸浮細胞

1.用75%酒精噴灑整個瓶消毒,然后置于無菌操作臺,打開瓶口,輕輕吹打后,將其中的細胞懸液轉移到離心管中,然后1200rpm離心3min,去上清;

2.將離心好的細胞轉移至T-25瓶中,并加入5-6mL新鮮培養基,然后將其置于細胞培養箱中培養,根據細胞生長狀況及培養基顏色變化對其進行換液(離心后去舊液,加入新鮮培養基);

3.顯微鏡觀察細胞數目比較多時,對其進行傳代,di一次傳代比例為1:2(離心后平均分成兩瓶培養)。

 

細胞總數:

1~3*106

傳代周期:

2-3天

傳代比例:

1:2~1:4

換液頻率:

2-3天

凍存液:

90%FBS+10%DMSO

 

四、注意事項:

1 收到細胞后首先觀察T-25瓶是否有損壞、漏液、渾濁等現象,若有上述現象發生請及時和我們聯系。

2 瓶中運輸的培養液不能重復使用,請換新鮮培養液培養

3 對于貼壁細胞,若大部分細胞漂浮,置于培養箱隔夜觀察,大部分漂浮細胞重新貼壁,表明細胞活力正常,繼續培養,剩余漂浮的細胞可以去掉;若大部分細胞仍然不貼壁,將漂浮的細胞離心收集,用臺盼藍染色鑒定細胞活力,并與本公司銷售人員及時聯系。

4 建議客戶收到細胞后不同倍鏡各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,如細胞狀態出現問題請于72h內與本公司銷售聯系,以便于更好的幫您解決問題,超過時間我段,本公司則默認細胞狀態良好,不免費對后續細胞狀態問題進行售后。

 LLC細胞|LLC-LUC小鼠肺癌熒光素酶標記細胞 處理方法  含STR鑒定

 

可選擇干冰運輸及發送復蘇存活細胞方式:

 

 

 

(1)干冰運輸,收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇;

 

 

 

(2)存活細胞,收到后應繼續生長,傳代達到細胞生長狀態良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。

 

 

 

(3)收到細胞后請拍照,3天內如果發現污染,請及時拍照與我們聯系。

 

 

 

用途:僅供科研使用。

 

LLC-luc小鼠肺癌細胞-熒光素| LLC-luc細胞

 

小鼠胚胎干細胞接收后的處理:

 

 

 

1) 收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發給我們。

 

 

 

2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態,去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。

 

 

 

3) 棄去T25瓶中的培養基,添加6ml新的*培養基。

 

 

 

4) 如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代。

 

 

 

5) 接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發現污染或疑似污染,請及時與我們取得聯系。

 

 

 

 細胞培養步驟

 

 

 

一.培養基及培養凍存條件準備:

 

 

 

1) 準備L-15培養基;優質胎牛血清,10%;雙抗,1%。

 

 

 

2) 培養條件: 氣相:空氣,100%。 溫度:37攝氏度。

 

 

 

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。

 

A。僅供研究之用。

 

運輸保存:采用干冰保存運輸。收到細胞時,若干冰已經*融化,請立即將細胞復蘇培養;若尚留有干冰,請立即將細胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細胞,切不可將細胞置于高溫環境。

 

OSKM-1小鼠誘導型多能干細胞一般培養方法:

 

1、組織塊培養法

 

A)按照前述方法取材,將組織剪成或切成1mm3大小的小塊,并加入少許培養基使組織濕潤。

 

B)將小塊均勻涂布于瓶壁,每小塊間距0.2 cm~12.5px,一般在25mL培養瓶(底面積為437.5px2)可接種20~30小塊為宜,小塊放置后,輕輕翻轉培養瓶,使瓶底朝上,然后于瓶內加入適量培養基蓋好瓶塞,將瓶傾斜放置在37℃溫箱內。

 

C)培養2~4小時,待小塊貼附后,將培養瓶緩慢翻轉平放,靜置培養,動作要輕,嚴禁搖動和來回振蕩,以防小鼠誘導型多能干細胞由于沖動而使小塊漂起而造成培養失敗,若組織塊 不易貼壁可預先在瓶壁涂一薄層血清、胎汁或鼠尾膠原等。開始培養時培養基不宜多,以保持組織塊濕潤即可,培養24小時后再補液,培養初期移動和觀察時要輕 拿輕放,開始幾天盡量不去搬動,以利貼壁和生長,培養3~5天時可換液,一方面補充營養,一方面去除代謝產物和漂浮小塊所產生的毒性作用。

 

2、消化培養法

 

該方法是采用前述的消化分散法,將妨礙細胞生長的細胞間質(包括基質、纖維等)去除,使細胞分散形成細胞懸液,然后分瓶培養。

 

3、懸浮細胞培養法

 

對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

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