做轉染試驗時小編就抱著一個信仰，就是要給細胞點“色彩”看（熒光），但你知道嗎？就這個簡單的試驗進程，小小的細胞卻有著大大的能量，試驗進程中帶陽離子的脂質體充當著“搬運工”的角色將質粒從胞外“抓”到胞內，而細胞為質粒的仿制、轉錄、翻譯提供“場所和原材料”，自己也跟著“增光填色”,但“上色”進程中會遇到一些問題，總結下來主要有以下二個方面：

細胞狀況差

轉染功率低

1：轉染后細胞狀況較差

A：剖析：主要是鋪板和反響液配制的原因

細胞狀況是整個試驗的要害，假如細胞狀況欠好，則轉染后細胞狀況當然就好不了

鋪板：過多或不均勻，細胞長的太滿就會狀況較差

脂質體本身有毒性，假如脂質體加入量太多，會導致細胞狀況較差，或者細胞死亡，主張在做正式試驗前，先做一下預試驗，探索一下質粒和脂質體的配比。

2：轉染后熒光功率低

A：剖析：主要是細胞原因和“搬運”進程中的問題

1、細胞狀況仍然是重中之重，假如有一段時間轉染效果很不理想，必需求換一批次細胞；

2、加入意圖質粒后悄悄混勻，太用力會損壞混合液的結構，

3、質粒與轉染試劑的比值： 過高一部分質粒不能進入細胞，過低“搬運工”太多，有毒性且浪費；

4、吸、打液體時注意槍頭內液面高度，是否*打出；

5、反響液配好后等待20min，質粒才會被*包裹；

 6、反響液滴加加入細胞，使“脂質體+質粒”均勻分布；

7、質粒重復凍融影響濃度，盡量削減凍融次數；脂質體 -20℃保存，用完應立刻放回；

8、必要時需求檢測一下質粒的濃度是否精確；