不同的細(xì)胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個(gè)不僅僅是說(shuō)培養(yǎng)基的不同,還有就是細(xì)胞生長(zhǎng)的空間密度問(wèn)題。有一些細(xì)胞是數(shù)量多一點(diǎn)比較好生長(zhǎng),生長(zhǎng)情況也比較好。這種一般是歸于生長(zhǎng)速度慢的細(xì)胞。比方內(nèi)皮細(xì)胞。而有一些是細(xì)胞是數(shù)量少一點(diǎn)細(xì)胞情況會(huì)生長(zhǎng)的比較好,比方巨噬細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞。尤其是巨噬細(xì)胞,生長(zhǎng)速度十分得快,貼壁速度很快,所以傳代時(shí)就應(yīng)該留很少量的細(xì)胞,這樣細(xì)胞情況會(huì)比較好。并且巨噬細(xì)胞比較喜歡扎堆生長(zhǎng),而堆與堆之間是有空間的。假設(shè)長(zhǎng)成相連在一起的一滿片的時(shí)分,細(xì)胞形狀基本上就會(huì)差了,老化的會(huì)比較多,對(duì)后期實(shí)驗(yàn)結(jié)果是欠好的。所以在養(yǎng)細(xì)胞的時(shí)分應(yīng)該摸索該細(xì)胞喜歡的生長(zhǎng)空間密度問(wèn)題。
關(guān)于有些人總是會(huì)遇到養(yǎng)的細(xì)胞形狀怎樣都欠好的問(wèn)題。這個(gè)其實(shí)是有一個(gè)方法可以改善的。關(guān)于貼壁細(xì)胞,假設(shè)細(xì)胞形狀欠好,(或許細(xì)胞形狀不明晰,表面似有異物等)可以在傳代的時(shí)分進(jìn)行如下操作:
首要,倒掉舊的培養(yǎng)基,參與 3 ml 新的培養(yǎng)基(有無(wú)血清的都可)洗刷一次,用滴管吸走,然后再參與 3 ml 的培養(yǎng)基,進(jìn)行預(yù)吹打,操控吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過(guò)一遍,然后吸走。這時(shí)侯再開(kāi)始正式的消化、吹打。
其次,把吹打下來(lái)的細(xì)胞懸液參與到新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),培養(yǎng)瓶事前參與培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時(shí)刻點(diǎn)查詢細(xì)胞貼壁情況。10 分鐘查詢一次,20 分鐘,30 分鐘查詢一次。選擇一個(gè)時(shí)刻點(diǎn),已經(jīng)有部分細(xì)胞貼壁的情況下,從頭置于潔凈臺(tái),底面朝上靈敏倒出其間的培養(yǎng)基,參與 3 ml 新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后參與*培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)查詢細(xì)胞生長(zhǎng)情況以及形狀。
假設(shè)一次效果還不抱負(fù),可重復(fù)屢次。直到找到細(xì)胞形狀。其間要注意,結(jié)合細(xì)胞喜歡的生長(zhǎng)情況。喜歡多一點(diǎn)數(shù)量長(zhǎng)得好的細(xì)胞你就等貼壁細(xì)胞比較多點(diǎn)的時(shí)分再傳。反之亦然。
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