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NCI-H1650-LUC人非小細(xì)胞肺癌熒光素酶標(biāo)記細(xì)胞 處理方法

來源:上海琛藝實業(yè)有限公司   2020年04月12日 15:01  

上海琛藝實業(yè)有限公司新增細(xì)胞庫,具有自己的研發(fā)細(xì)胞培養(yǎng)庫,上千株細(xì)胞具有STR鑒定,開學(xué)大放送,*,同時還有好禮相送,具體歡迎咨詢我們銷售人員。。。。

NCI-H1650-LUC人非小細(xì)胞肺癌熒光素酶標(biāo)記細(xì)胞 處理方法 含STR鑒定

細(xì)胞培養(yǎng)中有哪些要注意的問題?又該如何解決呢?
1
液體培養(yǎng)基可以放-20℃保存嗎?
不可以!因為在-20℃下,培養(yǎng)基中的鹽容易析出,培養(yǎng)基融化后,有的鹽可能無法重新溶解,從而導(dǎo)致培養(yǎng)基滲透壓降低,培養(yǎng)細(xì)胞時,細(xì)胞容易破裂而死亡。
2
為何培養(yǎng)基保存于4℃冰箱中,顏色會偏暗紅色,且pH值越來越偏堿性?
培養(yǎng)基保存于4℃冰箱中, 培養(yǎng)基內(nèi)之CO2 會逐漸溢出,造成培養(yǎng)基越來越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑(通常為phenol red) 的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結(jié)果, 將造成細(xì)胞生長停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時, 可以通入無菌過濾之CO2, 以調(diào)整pH 值。

 

購買上海佰曄物細(xì)胞注意事項(佰曄生物)發(fā)布
一、客戶收到細(xì)胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;
收到細(xì)胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費發(fā)送一株細(xì)胞。
二、如為貼壁細(xì)胞,請在顯微鏡下觀察細(xì)胞密度:
1.  未超過80%匯合度時,用75%酒精(建議配置75%酒精的水也是滅菌超純水,噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),嚴(yán)格無菌操作;然后打開蓋子,先用槍頭把培養(yǎng)基吸出10ml左右,放在離心管里,然后瓶口過火(嚴(yán)禁直接傾倒),這樣可以保證不污染,再用10ml的移液管,將剩余的培液全部吸出,放于離心管中,培養(yǎng)瓶中只剩余10ml左右培液就可以了。培養(yǎng)16hr(時間根據(jù)細(xì)胞生長情況調(diào)整)之后,傳代或者凍存。
2. 超過80%匯合度時,請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:
1) 棄去培養(yǎng)液,用3ml PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次;
2) 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM  EDTA)于T25培養(yǎng)瓶中,倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓分散,輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,細(xì)胞隨即脫落下來;
3) 加入6-8ml*培養(yǎng)基,吸出,分到新的培養(yǎng)瓶中,按要求分瓶。
三、如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液,1000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
注意:換液時一半用我們的培養(yǎng)基,一半用你們的,以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長不好。
四、細(xì)胞出現(xiàn)問題,可重發(fā)的情況有哪些?判定標(biāo)準(zhǔn)是什么?
(1)細(xì)胞運輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細(xì)胞靜置24小時后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時后并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
五、細(xì)胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(4)細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
(6)視具體情況而定。
六、售后服務(wù)政策
Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan   NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex    Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價,另常備  Trizol  DMSO  lipo2000     lipo3000  SC-2004  SC-2005常備現(xiàn)貨 ;貨期短,價格優(yōu),售后齊全。

NCI-H1650-LUC人非小細(xì)胞肺癌熒光素酶標(biāo)記細(xì)胞 處理方法 含STR鑒定

如用戶收到細(xì)胞8-30天之內(nèi),因處理不當(dāng)造成細(xì)胞死亡或污染,我公司將優(yōu)惠價重新提供一株原細(xì)胞
質(zhì)量可靠,售后有保障

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