上海琛藝實業有限公司經過數年的努力發展已迅速成為集產品研發、生產、經營為一體的專業化生物工程公司。公司新引進細胞上千株，其中人的已通過STR鑒定的有幾百株，歡迎各位選購。。。。。。

產品名稱：MKN-28-GFP人胃癌高轉移綠色標記細胞 處理方法 含STR鑒定

包裝：內層無菌自封袋；防壓泡沫盒；外層防壓保溫氣泡袋；說明書

細胞來源：ATCC、sciencell、ICLC

貨期：1-2周

運輸方式：快遞運輸

售后：收到細胞后12天，如發現細胞有質量問題（如污染，死亡，快遞運輸等原因）時，應出具書面質量問題報告并及時通知銷售人員，我們將盡快為您解決！

注：耐藥細胞培養操作流程和普通細胞培養方法基本一致，只是在培養中會加藥維持篩選壓力

MKN-28-GFP人胃癌高轉移綠色標記細胞 處理方法

?三、細胞生長條件：

細胞系特征

細胞株名稱：MKN-28-GFP人胃癌高轉移綠色標記細胞 處理方法

組織來源：人胃癌

生長特性：懸浮生長

微生物及支原體檢測：陰性

安全性：所有腫瘤和病毒轉染的細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。

培養條件：

*培養基：90%RPMI-1640+10%胎牛血清+0.1ug/ml FU

GIBCOFBS-10099-141或HYCLONEFBS-SH30084.03。

培養條件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

傳代方法：

收到細胞后，在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。

（一）如果細胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內，嚴格無菌操作，低速離心，打開細胞培養瓶，吸出培養液（注意不要吸出細胞），換 10ml新鮮培養液后繼續培養。

(二)如果細胞已長滿，即可進行傳代培養。具體步驟如下：

1. 低速離心，棄去培養液，用PBS（不含鈣,鎂離子）洗1-2次。

2. 按6-8ml/瓶補加*培養基，輕輕打勻后吸出一半，分到新的培養瓶中（補加*培養基至8到10ml）。如果沒有特別說明，收到細胞后的di一次傳代一般是一傳二。

注：1、觀察細胞在低倍鏡（4或5X物鏡)下進行，否則不能準確判斷細胞的傳代密度。看細胞的形態請在10X或20X物鏡下。

2、瓶中運輸培養基不能重復再用,請換用加雙抗的新培養基，細胞凍存后,培養基中可不加任何抗生素。

3、有些細胞貼壁不牢，如發現貼壁細胞有脫落，可離心吹打后接種到新瓶內。

4、收到細胞后，若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請及時與我們聯系。

凍存方法：   凍存液：90%胎牛血清，10%DMSO

  儲存：液氮儲存

收到細胞后應如何去正確的處理：

   您需要準備好細胞所要用到的培養基和相關試劑，雖然所有的貼壁，半貼壁或者懸浮細胞處理方式差不多，但是不同的實驗室培養條件和處理力度還有試劑的批間差這些問題存在，也會導致對細胞處理不當，或者環境的不適應而造成細胞的死亡。

       1.收到細胞，di一時間要鏡檢：觀察細胞形態是否正常，對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很好，觀察細胞密度，有疑議及時咨提供細胞的技術人員。由于運輸的時間或者溫度的變化，很多貼壁細胞在盛滿培養基的瓶子里生長的狀態和平時會有點不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如293T，平時貼壁就不是很牢，在裝滿的培養基瓶子里面，會發生大片的脫落，細胞聚集在一起，但是細胞生長還是正常的，通過離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長。

       2.當通過上一步的觀察，細胞初步沒有任何問題時，進行下一步操作。當收到的細胞密達到80%左右時，則處理如下：棄除瓶中大部分培養基，僅保留5到10mL培養所需的常規培養基；或更換新鮮的培養基，置于培養箱中，隨后每天觀察。細胞在低于正常生長溫度情況下，會調整為靜止期，或者慢速生長期，必須恢復37度的環境至少3個小時左右，才能重新調整到接近對數生長期的狀態，在對數生長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率，和細胞的存活率。

       3.如果經di一步觀察發現細胞密度超過90%，并且細胞狀態很好時，則復溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應依據不同的細胞而定。對于生長比較快，狀態穩定，不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶；對于生長較慢，細胞比較薄，狀態容易波動的細胞類型，一次少傳些，保證每瓶細胞密度大些，便于穩定生長。至于一些比較陌生的細胞，di一次處理也可以依照第二種情況。

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