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人嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒操作步驟

來源:上海琛藝實業有限公司   2020年03月30日 16:58  

人嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒操作步驟的詳細資料:

英文名稱:Human eosinophil cationic protein (ECP) ELISA kit

貨號:KS15148

規格:96T/48T

使用范圍:僅限科研范圍內使用

各種種屬:人、大小鼠、豚鼠、兔子、豬、犬、牛、羊… 
標本齊全:血清、血漿、細胞培養上清液、組織勻漿、組織液、關節液、胸腔yi液等… 
保存條件:2-8℃ 
人嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒提供ELISA代做實驗

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自備材料 
1. 蒸餾水。 
2. 加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。 
3. 振蕩器及磁力攪拌器等。 
安全性 
1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。 
2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。 
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。 
人嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒操作注意事項 
1. 試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。 
2. 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。 

3. 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。 
4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。 
5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品 
6. 洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。 
7. 底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。 
8. 加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。 
9. 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。 
人嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒操作步驟

樣品收集、處理及保存方法 
1、 血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆 
3、 細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。 
4、 保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 
人嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒操作步驟 
1. 使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。 
2. 根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。 
3. 加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。 
4. 甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。 
5. 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。 
6. 甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。 
7. 每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。 
8. 取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。 
9. 在450nm波長處測定各孔的OD值。 

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