上海琛藝實(shí)業(yè)有限公司經(jīng)過(guò)數(shù)年的努力發(fā)展已迅速成為集產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn)、經(jīng)營(yíng)為一體的專業(yè)化生物工程公司。公司新引進(jìn)細(xì)胞上千株，其中人的已通過(guò)STR鑒定的有幾百株，歡迎各位選購(gòu)。。。。。。

產(chǎn)品名稱：L1210-GFP小鼠白血病綠色標(biāo)記細(xì)胞 處理方法

包裝：內(nèi)層無(wú)菌自封袋；防壓泡沫盒；外層防壓保溫氣泡袋；說(shuō)明書(shū)

細(xì)胞來(lái)源：ATCC、sciencell、ICLC

貨期：1-2周

運(yùn)輸方式：快遞運(yùn)輸

售后：收到細(xì)胞后12天，如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問(wèn)題（如污染，死亡，快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí)，應(yīng)出具書(shū)面質(zhì)量問(wèn)題報(bào)告并及時(shí)通知銷售人員，我們將盡快為您解決！

?三、細(xì)胞生長(zhǎng)條件：

一、組成：

組份 數(shù)目

細(xì)胞 1 T-25瓶

細(xì)胞說(shuō)明書(shū) 一份

二、細(xì)胞簡(jiǎn)介：

生長(zhǎng)特性： 貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞來(lái)源： 從ATCC/中科院/協(xié)和醫(yī)院等地引進(jìn)

培養(yǎng)條件： 培養(yǎng)基：1640 +10%FBS（推薦德國(guó)BI 04-002-1A

優(yōu)等胎牛血清）

氣相：空氣95%，二氧化碳5%

溫度：37℃

培養(yǎng)： 一、貼壁細(xì)胞

1.用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒，將其平躺置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行2-3小時(shí)的緩沖，.然后置于無(wú)菌操作臺(tái)，打開(kāi)瓶口，將其中的培養(yǎng)液去掉，再往其中加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基并置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀況及培養(yǎng)基顏色變化對(duì)其進(jìn)行換液以及傳代；

2.待細(xì)胞長(zhǎng)滿瓶底面積80%-90%，需要對(duì)其進(jìn)行傳代，di一次傳代比例為1:2。

3傳代步驟：將0.25%含EDTA胰酶置于37°預(yù)熱，倒掉培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，往培養(yǎng)瓶中加入1mlPBS，輕晃洗滌后棄去。往瓶中加1ml預(yù)熱好的胰酶，置于37°孵育消化（di一次消化需時(shí)常取出置于顯微鏡下觀察，以顯微鏡下細(xì)胞觸角回收變圓、輕拍瓶壁見(jiàn)細(xì)胞脫落為*消化時(shí)間，記錄*消化時(shí)間，以便于下次消化），消化好后加入1ml*培養(yǎng)基終止消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞，使之*脫落，然后收集細(xì)胞懸液，1200rpm離心3min，棄上清，加入*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，進(jìn)行傳代。

L1210-GFP小鼠白血病綠色標(biāo)記細(xì)胞 處理方法

二、懸浮細(xì)胞

1.用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒，然后置于無(wú)菌操作臺(tái)，打開(kāi)瓶口，輕輕吹打后，將其中的細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到離心管中，然后1200rpm離心3min，去上清；

2.將離心好的細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T-25瓶中，并加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基，然后將其置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀況及培養(yǎng)基顏色變化對(duì)其進(jìn)行換液（離心后去舊液，加入新鮮培養(yǎng)基）；

3.顯微鏡觀察細(xì)胞數(shù)目比較多時(shí)，對(duì)其進(jìn)行傳代，di一次傳代比例為1:2（離心后平均分成兩瓶培養(yǎng)）。

細(xì)胞總數(shù)： 1~3*106

傳代周期： 2-3天

傳代比例： 1:2~1:4

換液頻率： 2-3天

凍存液： 90%FBS+10%DMSO

四、注意事項(xiàng)：

1 收到細(xì)胞后首先觀察T-25瓶是否有損壞、漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

2 瓶中運(yùn)輸?shù)呐囵B(yǎng)液不能重復(fù)使用，請(qǐng)換新鮮培養(yǎng)液培養(yǎng)

3 對(duì)于貼壁細(xì)胞，若大部分細(xì)胞漂浮，置于培養(yǎng)箱隔夜觀察，大部分漂浮細(xì)胞重新貼壁，表明細(xì)胞活力正常，繼續(xù)培養(yǎng)，剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉；若大部分細(xì)胞仍然不貼壁，將漂浮的細(xì)胞離心收集，用臺(tái)盼藍(lán)染色鑒定細(xì)胞活力，并與本公司銷售人員及時(shí)聯(lián)系。

4 建議客戶收到細(xì)胞后不同倍鏡各拍幾張細(xì)胞的照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，如細(xì)胞狀態(tài)出現(xiàn)問(wèn)題請(qǐng)于72h內(nèi)與本公司銷售聯(lián)系，以便于更好的幫您解決問(wèn)題，超過(guò)時(shí)間我段，本公司則默認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)良好，不免費(fèi)對(duì)后續(xù)細(xì)胞狀態(tài)問(wèn)題進(jìn)行售后。

做細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的同學(xué)看過(guò)來(lái)。

選擇上海琛藝生物細(xì)胞有3個(gè)理由：

1、細(xì)胞狀態(tài)好，形態(tài)佳，易成活，是市面上比較好養(yǎng)的細(xì)胞之一;

2、物流迅速，復(fù)蘇好后發(fā)貨，次日就能到;