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人蛋白聚糖(PG)ELISA試劑盒操作步驟

來源:上海琛藝實業有限公司   2020年03月17日 14:53  

人蛋白聚糖(PG)ELISA試劑盒操作步驟
1.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50µl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測樣品 10µl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50µl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3
8.洗滌:操作同 5
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10.
終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止 液后 15 分鐘以內進行。
人蛋白聚糖(PG)ELISA試劑盒操作步驟?    英文名稱:Human Proteoglycan,PG ELISA Kit      檢測方法:elisa酶聯免疫分析法ELISA生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗方法。其試劑穩定、易保存,操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質量問題,收貨后十五個工作日內包退換。 
一、標本要求 
1
.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。 
2
.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
人蛋白聚糖(PG)elisa試劑盒保存二、注意事項
1.  此試劑為體外檢測試劑,效期內使用,試劑應視為傳染物,不同總批號的試劑不能混用。
2. 使用前應將盒內各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,
3. 濃縮洗滌液出現結晶后,請于37℃孵育15分鐘。
4. 濃縮樣品稀釋液出現結晶后,請于37℃孵育15分鐘
5. 若24小時內進行實驗,標本可存放于28℃。不需及時實驗,標本-20℃保存,避免反復凍融。
6. 在反復清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,否則將降低精確度,造成吸光度偏離的假像。
7. 加樣完畢后,應注意輕微搖動微孔反應條,以便使孔中的液體充分混勻。
8. 試劑盒保存于28℃,請勿冷凍,有效期請見盒內標示。
三、實驗前準備
1.使用前應將盒內各試劑取出,室溫放置至少30分鐘。
2.準備各種實驗儀器及材料,如微量移液器,吸頭,醫用蒸餾水等
3.濃縮洗液與醫用蒸餾水119倍稀釋后成為應用洗滌液
4.濃縮樣品稀釋液與醫用蒸餾水14倍稀釋成應用樣品稀釋液
5.用應用樣品稀釋液來稀釋樣品,按照1100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應用樣品稀釋液中,充分混勻待用。

 

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