IEC-6細胞傳代細胞，活性好、存活率高、質量保證，生長狀態良好，沒有細菌 真菌 支原體等微生物污染。IEC-6細胞一般以T25培養瓶包裝，容積75ml細胞數量可達10的6次方左右。

細胞名稱：IEC-6-GFP大鼠小腸引窩上皮綠色標記細胞 培養步驟

物種：大鼠

規格：T25培養瓶，1×106cells

形態特征：上皮細胞樣

生長特性：貼壁

產品描述
皮質醇可抑制該細胞的生長。該細胞表達腸上皮*抗原，在20代以前保持恒定的生長速度和細胞形態，此后生長速度迅速下降，細胞形態也發生改變。

培養條件：DMEM-H 5%FBS 0.01mg/ml Insulin

傳代方法：1:3-1:6傳代，每周換液2次。

IEC-6細胞復蘇時如何換液呢？

1凍存細胞取出后37℃速溶，取15ml離心管，加入10ml含血清培養基，將凍存管中液體（通常1.5ml）也加入離心管中，習慣輕吹幾下混勻，1200轉常溫離心5min，去掉上清，加入5ml含血清培養基，輕吹制成細胞懸液，加入到培養瓶中，即可。

注意，新復蘇的IEC-6細胞不要經常去看去動。

換液的話，只要把培養基吸出，再加入新的培養基就可以了

如果你復蘇的細胞長得很不均勻，可以胰酶消化下來再混勻后在重新加進去（像正常細胞一樣做）。

兩種方案可供選擇：

一、復蘇時，行離心，棄上清后，種入瓶中。主要目的是防止DMSO對細胞造成損害，但剛復蘇的細胞教脆弱，離心易導致細胞破碎。

二、IEC-6細胞復蘇時，直接將凍存管里的液體倒入培養瓶中，另外添加適量的培養基，孵箱24h，待貼壁后行常規換液。省去了離心一步，避免離心時細胞破裂。但DMSO未能去除，長時間培養可能會對細胞有損害。個人覺得第二種方案較方便。
 
IEC-6-GFP大鼠小腸引窩上皮綠色標記細胞 培養步驟：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL*培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入6cm皿中），培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
 
1、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加5ml以上含10%血清的*培養基終止消化。
3.輕輕吹打細胞，*脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養液，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6 ml培養液的新皿中或者瓶中。
PS：若客戶收到2ml小管細胞，收到細胞后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內，嚴格無菌操作；將小管細胞轉移至T25培養瓶或6cm培養皿，加入5ml左右*培養基混勻，放入培養箱過夜培養后查看細胞密度：若密度未超過80%，換液繼續培養，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進行傳代（方法同上）。
2、對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
 
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，進行離心收集，1000RPM條件下離心8-10分鐘，去除上清，按凍存數量加入血清及DMSO，凍存比例為90%FBS+10%DMSO。
 
PS：若客戶收到2ml小管細胞，收到細胞后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內，嚴格無菌操作；將小管細胞轉移至T25培養瓶或6cm培養皿，加入5ml左右*培養基混勻，放入培養箱過夜培養后查看細胞密度：若密度未超過80%，換液繼續培養，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進行傳代（方法同上）。
 
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