產品名稱： HT-29-LUC人結腸癌熒光素酶標記細胞 培養步驟

商品貨號： HT-29-LUC人結腸癌熒光素酶標記細胞

細胞污染： HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。

細胞傳代步驟： 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

細胞復蘇步驟： 將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

細胞凍存步驟： 待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例；1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細胞變圓脫落后，加入2ml*培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

HT-29-LUC人結腸癌熒光素酶標記細胞 培養步驟

形態特性 上皮細胞樣　 

生長特性 貼壁生長 

凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS　 

細胞周期分為細胞間期和細胞分裂期，細胞間期較長，而細胞分裂期較短。

細胞間期是為細胞分裂的準備時期，表現為細胞增大，營養物質增多。細胞分裂期則是一個細胞由兩個細胞分解為一個細胞的過程。

細胞是生命的基本單位，細胞的特殊性決定了個體的特殊性，因此，對細胞的深入研究是揭開生命奧秘、改造生命和征服疾病的關鍵。細胞生物學已經成為當代生物科學中發展zui快的一門學科，是生物、農學、醫學、畜牧、水產和許多生物相關專業的一門必修課程。

依據細胞種類和濃度，于無菌操作臺內取 10 ml培養基加至 T25或 T75 flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入T25 或T75 flask 內之培養基， 混 合均勻，放入37 °C，5 % CO2 培養箱培養。