HCT-8-GFP人結(jié)腸癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記 培養(yǎng)步驟
上海琛藝實(shí)業(yè)有限公司新增細(xì)胞庫(kù),具有自己的研發(fā)細(xì)胞培養(yǎng)庫(kù),上千株細(xì)胞具有STR鑒定,開(kāi)學(xué)大放送,*,同時(shí)還有好禮相送,具體歡迎咨詢我們銷(xiāo)售人員。。。。
產(chǎn)品名稱(chēng):HCT-8-GFP人結(jié)腸癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記 培養(yǎng)步驟
?細(xì)胞數(shù)量: 1*10^6
?細(xì)胞種屬: 人源
?生長(zhǎng)特性: 貼壁
?培養(yǎng)基: DMEM-H
?形態(tài)特征: 成纖維細(xì)胞樣
?傳代方法: 1:3傳代,2-3天傳一代
?培養(yǎng)條件: 胎牛血清至終濃度為10%。環(huán)境:空氣,95%;二氧化碳(CO2),5%;溫度,37℃
?細(xì)胞描述: 親本L的亞克隆,是早建立的連續(xù)傳代細(xì)胞之一,L細(xì)胞源自100天的雄性C3H/An小鼠的皮下網(wǎng)眼狀空隙和脂肪組織。APRT+,HPRT+。
?細(xì)胞凍存: 液氮凍存(凍存液基礎(chǔ)培養(yǎng)基+20%FBS+10%DMSO)
?細(xì)胞運(yùn)輸: 干冰運(yùn)輸(2ml凍存管)或活細(xì)胞運(yùn)輸(T25瓶)
細(xì)胞特性
1)來(lái)源:結(jié)腸
2)形態(tài):上皮細(xì)胞樣
3)含量:>1x106 個(gè)/mL
4)污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性
5)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
HCT-8細(xì)胞培養(yǎng)的一般過(guò)程:
一、準(zhǔn)備工作
1.器皿的清潔、干燥和消毒;
2.培養(yǎng)基與其他試劑的配制、分裝及滅菌;
3.無(wú)菌室或超凈臺(tái)的清潔與消毒;
4.培養(yǎng)箱及其他儀器的檢查與調(diào)試等等。
二、取材
在無(wú)菌環(huán)境下從機(jī)體取出某種組織細(xì)胞。理論上各種動(dòng)物和人體組織都可用于培養(yǎng),但幼體組織尤其是胚胎組織更易培養(yǎng)。取材時(shí)應(yīng)在無(wú)菌環(huán)境下盡快處理并培養(yǎng)。
三、培養(yǎng)
1.組織塊培養(yǎng),直接放置于器皿底部,幾個(gè)小時(shí)后再加入培養(yǎng)基;細(xì)胞系培養(yǎng),先行計(jì)數(shù),按一定量接入器皿并直接加入培養(yǎng)基。細(xì)胞進(jìn)入培養(yǎng)器皿后立即放入培養(yǎng)箱中,使細(xì)胞今早進(jìn)入生長(zhǎng)狀態(tài)。
2.每隔一定時(shí)間觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況、形態(tài)、有無(wú)污染、PH值以及二氧化碳濃度等等。
3.原代細(xì)胞一般有一段潛伏期,潛伏期內(nèi)細(xì)胞不分裂,但可貼壁或游走。過(guò)了潛伏期細(xì)胞便進(jìn)入分裂期。細(xì)胞長(zhǎng)滿平底之后要代傳培養(yǎng)。
四、凍存及復(fù)蘇
一般采用-196℃的液氮凍存,凍存管中加入含有保護(hù)劑的培養(yǎng)基。復(fù)蘇即從液氮中取出凍存管后,立即放入37℃的水中迅速融解,然后將HCT-8細(xì)胞轉(zhuǎn)入培養(yǎng)器皿中進(jìn)行培養(yǎng)。
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