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HCT9/FU-GFP人結腸癌氟尿嘧啶耐藥株-綠色標記 培養方法

來源:上海琛藝實業有限公司   2020年03月03日 10:38  

上海琛藝實業有限公司經過數年的努力發展已迅速成為集產品研發、生產、經營為一體的專業化生物工程公司。公司新引進細胞上千株,其中人的已通過STR鑒定的有幾百株,歡迎各位選購。。。。。。

產品名稱:HCT9/FU-GFP人結腸癌氟尿嘧啶耐藥株-綠色標記 培養方法

包裝:內層無菌自封袋;防壓泡沫盒;外層防壓保溫氣泡袋;說明書

細胞來源:ATCC、sciencell、ICLC

貨期:1-2周

運輸方式:快遞運輸

售后:收到細胞后12天,如發現細胞有質量問題(如污染,死亡,快遞運輸等原因)時,應出具書面質量問題報告并及時通知銷售人員,我們將盡快為您解決!

?Hepa 1-6細胞 Hepa 1-6小鼠肝癌細胞

?三、細胞生長條件:

 

一、組成:

組份 數目

細胞 1 T-25瓶

細胞說明書 一份

二、細胞簡介:

生長特性: 貼壁生長

 

細胞來源: 從ATCC/中科院/協和醫院等地引進

培養條件: 培養基:1640 +10%FBS(推薦德國BI 04-002-1A

優等胎牛血清)

氣相:空氣95%,二氧化碳5%

溫度:37℃

培養: 一、貼壁細胞

1.用75%酒精噴灑整個瓶消毒,將其平躺置于培養箱中進行2-3小時的緩沖,.然后置于無菌操作臺,打開瓶口,將其中的培養液去掉,再往其中加入5-6mL新鮮培養基并置于細胞培養箱中培養,根據細胞生長狀況及培養基顏色變化對其進行換液以及傳代;

2.待細胞長滿瓶底面積80%-90%,需要對其進行傳代,di一次傳代比例為1:2。

3傳代步驟:將0.25%含EDTA胰酶置于37°預熱,倒掉培養瓶中的培養基,往培養瓶中加入1mlPBS,輕晃洗滌后棄去。往瓶中加1ml預熱好的胰酶,置于37°孵育消化(di一次消化需時常取出置于顯微鏡下觀察,以顯微鏡下細胞觸角回收變圓、輕拍瓶壁見細胞脫落為*消化時間,記錄*消化時間,以便于下次消化),消化好后加入1ml*培養基終止消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細胞,使之*脫落,然后收集細胞懸液,1200rpm離心3min,棄上清,加入*培養基重懸細胞,進行傳代。

 

二、懸浮細胞

1.用75%酒精噴灑整個瓶消毒,然后置于無菌操作臺,打開瓶口,輕輕吹打后,將其中的細胞懸液轉移到離心管中,然后1200rpm離心3min,去上清;

2.將離心好的細胞轉移至T-25瓶中,并加入5-6mL新鮮培養基,然后將其置于細胞培養箱中培養,根據細胞生長狀況及培養基顏色變化對其進行換液(離心后去舊液,加入新鮮培養基);

3.顯微鏡觀察細胞數目比較多時,對其進行傳代,di一次傳代比例為1:2(離心后平均分成兩瓶培養)。

HCT9/FU-GFP人結腸癌氟尿嘧啶耐藥株-綠色標記 培養方法

細胞總數: 1~3*106

傳代周期: 2-3天

傳代比例: 1:2~1:4

換液頻率: 2-3天

凍存液: 90%FBS+10%DMSO

 

四、注意事項:

1 收到細胞后首先觀察T-25瓶是否有損壞、漏液、渾濁等現象,若有上述現象發生請及時和我們聯系。

2 瓶中運輸的培養液不能重復使用,請換新鮮培養液培養

3 對于貼壁細胞,若大部分細胞漂浮,置于培養箱隔夜觀察,大部分漂浮細胞重新貼壁,表明細胞活力正常,繼續培養,剩余漂浮的細胞可以去掉;若大部分細胞仍然不貼壁,將漂浮的細胞離心收集,用臺盼藍染色鑒定細胞活力,并與本公司銷售人員及時聯系。

4 建議客戶收到細胞后不同倍鏡各拍幾張細胞的照片,記錄細胞狀態,如細胞狀態出現問題請于72h內與本公司銷售聯系,以便于更好的幫您解決問題,超過時間我段,本公司則默認細胞狀態良好,不免費對后續細胞狀態問題進行售后。

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做細胞實驗的同學看過來。

選擇上海琛藝生物細胞有3個理由:

1、細胞狀態好,形態佳,易成活,是市面上比較好養的細胞之一;

2、物流迅速,復蘇好后發貨,次日就能到;

3、使用我司推薦的進口品牌血清進行培養實驗,效果更佳。

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