產品概述：H9c2(2-1)-GFP大鼠心肌細胞-綠色標記 培養方法 已通過STR鑒定

細胞名稱H9c2(2-1)（大鼠心肌細胞）

種屬大鼠

年齡（性別）

胚胎

組織來源

心臟，心肌層

生長特性

貼壁

細胞形態

成肌細胞樣

背景描述

H9c2(2-1)細胞是一株由Kimes·B和Brandt·B從BD1X大鼠胚胎心臟組織的克隆細胞株亞克隆得到的細胞株；H9c2(2-1)細胞表現出許多骨骼肌的特性。H9c2(2-1)細胞中的成肌細胞能融合形成多核的肌管，并對乙酰膽堿的刺激發生反應。如果培養基中的血清濃度下降到1%，H9c2(2-1)細胞融合發生得很快。

生長培養基

DMEM高糖(貨號:PM150210)＋10% FBS(貨號:164210-500)＋1% P/S(貨號:PB180120)

培養條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

傳代方法: 1：2至1：6，每周2次。

凍存條件: 90% *培養基+10% DMSO，液氮儲存

支原體檢測: 陰性

安全等級: 1

應用: 該細胞可以作為轉染宿主細胞。

參考文獻:

Kimes BW, Brandt BL. Properties of a clonal muscle cell line from rat heart. Exp. Cell Res. 98: 367-381, 1976. PubMed: 943302

Levy AP, et al. Post-transcriptional regulation of vascular endothelial growth factor by hypoxia. J. Biol. Chem. 271: 2746-2753, 1996. PubMed: 8576250

細胞圖片：

H9c2(2-1)細胞圖片

H9c2(2-1)細胞圖片

H9c2(2-1)細胞ATCC CRL-1446大鼠心肌細胞特點和簡介

B. Kimes and B. Brandt從源于BD1X大鼠胚胎心臟組織的克隆細胞株亞克隆了H9c2(2-1)細胞株。它表現許多骨骼肌的特性。 這個細胞株中的成肌細胞能融合形成多核的肌管，并對乙酰膽堿的刺激發生反應。 如果培養基中的血清濃度下降到1%，融合發生得很快。 在本庫通過支原體檢測。

H9c2(2-1)細胞ATCC CRL-1446大鼠心肌細胞接受后處理

1)  收到細胞后，請檢查是否漏液 ，如果漏液，請拍照片發給我們。

2)  請先在顯微鏡下確認細胞生長 狀態，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。

3)  棄去T25瓶中的培養基，添加 6ml本公司附帶的*培養基。

4)  如果細胞密度達80%-90%請及 時進行細胞傳代，傳代培養用6ml本公司附帶的*培養基。

5)  接到細胞次日，請檢查細胞是 否污染，若發現污染或疑似污染，請及時與我們取得聯系。

H9c2(2-1)細胞ATCC CRL-1446大鼠心肌細胞培養操作

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。

     1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

     2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

     3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。

     4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

      1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。

      2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。

     3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉入液氮灌 儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

H9c2(2-1)細胞ATCC CRL-1446大鼠心肌細胞培養注意事項

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現 象發生請及 時和我們聯系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所 需細胞因子 等，確保細胞培養條件一致。若由于培養條件不一致而導致細胞出現問 題，責任由客戶自行承擔。

3.   用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題貼壁細胞會有少量 從瓶 壁脫落，將細胞置于培養箱內靜置培養 4~6 小時,再取出觀察。此時多數細胞均 會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍 染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常， 請將細胞離心后用新鮮培養基再次貼壁培養；如果染色結果顯示細胞無活 力，請拍下 照片及時和我們聯系，信息確認后我們為您再免費寄送一次。

4.   靜置細胞貼壁后，請將細胞瓶內的培養基倒出，留 6~8mL 維持細胞正常培養，待細 胞匯 合度  80%左右時正常傳代。

5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。培養瓶內多余的培養基可收集備用，細胞 傳代時可以 一定比例和客戶自備的培養基混合，使細胞逐漸適應培養條件。

6.   建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和 Procell 技術 部 溝通交流。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯 系，告知細胞的具體情況，以便我們 的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

培養過程詳細圖片變化：

7. 該細胞僅供科研使用。

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