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今日解析:生物試劑的洗刷辦法

來源:研域生物技術(上海)有限公司   2020年02月07日 10:23  

洗刷這是試驗操作過程中看似很簡單但又至關重要的一個過程,所以今天結(jié)合技術人員的建議和輔導來給你們遍及一下這方面小常識。
生物試劑的洗刷辦法
1. 自動洗板機:每孔參加洗刷液350μl,注入與吸出間隔60秒。洗板5次。
2. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗刷液350μl,浸泡1-2分鐘,吸去(不行觸及板壁)或甩掉酶標板內(nèi)的液體,在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。
生物試劑試驗開端前,各試劑均應平衡至室溫;試劑或樣品配制時,均需充分混勻,并盡量防止起泡。
1.加樣:分別設空白孔、規(guī)范孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加規(guī)范品或待測樣品100μl,留意不要有氣泡,加樣時將樣品加于酶標板底部,盡量不觸及孔壁,悄悄晃動混勻。給酶標板覆膜,37℃孵育2小時。為保證試驗結(jié)果有效性,每次試驗請運用新的規(guī)范品溶液。
2.棄去液體,甩干,每個孔中參加Detection Ab工作液 100μl(在運用前15分鐘內(nèi)配制),酶標板加上覆膜,37℃溫育1小時。
3.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約350μl /每孔,甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。
4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl,加上覆膜,37℃溫育1小時。
5.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,辦法同過程3。
6.每孔加底物溶液100μl,酶標板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(依據(jù)實際顯況酌情縮短或延長,但不行超過30分鐘。當規(guī)范孔出現(xiàn)顯著梯度時,即可停止)。
7.每孔加停止液50μl,停止反響,此時藍色立轉(zhuǎn)。停止液的參加次序應盡量與底物液的參加次序相同。
8.生物試劑立即用酶標儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應提前翻開酶標儀電源,預熱儀器,設置好檢測程序。
9.試驗完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期完畢。

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