BGC-803-LUC人胃癌細胞-熒光素酶標記 處理方法
細胞名稱：人胃癌細胞；MGC-803
組織來源：胃癌細胞
培養條件：【BGC-803細胞】人胃癌細胞RPMI1640(W/oHepes)胎牛血清，10%
形態：貼壁；上皮細胞樣
細胞來源：：從一位53歲男性原發性胃低分化粘液樣腺癌患者建立。
我們有細胞庫和專業實驗室無菌操作，同時接受客戶復蘇、委托培養服務，并提供的科研項目解決方案以及實驗服務。購買我司細胞的客戶請先與公司細胞銷售人員核實訂購的細胞株名稱、種屬、貨號、數量、協商細胞價格并預約發貨期與提取方式。向銷售人員索取細胞株說明書并認真閱讀以方便你的實驗操作。
對于培養，只要我們細心操作，注意細節，并不是大家說的那樣困難。對于有經驗和有條件的客戶，我們提供專人指導。對于無培養經驗和條件的客戶，建議由公司代為培養細胞及進行后續研究。我司對每一位客戶追蹤服務，因材施教，對產品不僅售前負責，售后更負責。
我司BGC-803(人胃癌細胞)來源于ATCC細胞庫，價格實惠，質量有保證。嚴格質量控制，采用干冰保存運輸方式。所售細胞均現貨供應，*提供專業的細胞培養技術指導，也可代為培養。

BGC-803(人胃癌細胞)腺病毒轉化的人胚腎細胞；AAV-293

SV40轉染人成骨細胞；hFOB 1.19

SV40T轉化的人胚腎細胞；293T

人胚腎細胞；293 Cells, low passage

產品名稱：BGC-803(人胃癌細胞)

英文名稱：BGC-803 (human gastric carcinoma cell)

規格：5×105cells/瓶

產品貨號：EY-X0820

作用：科研使用不可應用于治療等其他方面

品    質：高活性，細胞實驗效果好

使用范圍：僅供科研使用

細胞特性：經測試，本產品具有良好的增殖和分化潛能，可分化為成骨細胞、脂肪細胞、軟骨細胞等。流式檢測結果顯示，CD29、CD44、CD105陽性，CD34、CD45陰性。

運輸保存：采用干冰保存運輸。收到細胞時，若干冰已經*融化，請立即將細胞復蘇培養；若尚留有干冰，請立即將細胞放入液氮中保存待用，請按條件貯存細胞，切不可將細胞置于高溫環境。

BGC-803-LUC人胃癌細胞-熒光素酶標記 復蘇操作要點：

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。

2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。

5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。

6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

1. 慢病毒包裝部分

1. 質粒共轉染細胞：轉染前一天，293T在10cm培養盤中的細胞達到90％，胰酶消化后，1：3傳入新10cm培養盤中。轉染時，細胞在培養盤中密度達到80％。采用脂質體PEI轉染法使編碼慢病毒包膜蛋白的質粒VSV G, Packaging Mix以及構建的Gluc或Mluc質粒15µg共轉染。6h后換新鮮DMEM培養基。

2．提取病毒上清：轉染48-72hours后，將含有病毒液的培養基轉移到15ml離心管中,在低溫4攝氏度條件下，3000rpm，離心10min去除片狀沉淀的細胞碎片。

3．濃縮病毒：將病毒上清用0.45um濾器過濾至濃縮離心管中，2000rpm，4℃，15min離心。濃縮液收集于500µl離心管中，-80℃保存。