細胞名稱：BEL/FU-GFP人肝癌氟尿嘧啶耐藥株-綠色標記 已通過STR鑒定

規格：70%密度的25cm2培養瓶的細胞一瓶

特點：細胞代數為2-3代

包裝：內層無菌自封袋；防壓泡沫盒；外層防壓保溫氣泡袋；說明書

細胞來源：ATCC

貨期：1-2周

運輸方式：快遞運輸

售后：收到細胞后7天，如發現細胞有質量問題（如污染，死亡，快遞運輸等原因）時，應出具書面質量問題報告并及時傳真或E-mail致銷售人員，我們將盡快為您解決。 

客戶收到細胞先不開蓋，放在培養箱靜置若干小時后（看細胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議受收細胞時的培養基拍一張照片，觀察培養基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100X，200X各一張），排除細胞本身污染的情況；

一、 細胞在培養瓶中培養至良好狀態后灌滿*培養液并封好瓶口是細胞運輸的*辦法。從細胞資源中心獲得細胞回到自己的實驗室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內，嚴格無菌操作。

二、 鏡下觀察：

未超過80%匯合度時，將瓶裝的*培養液移入無菌瓶中，留待日后培養用，原瓶（T25瓶）保留6-8ml*培養液，放入37℃、5%CO2孵箱培養；

超過80%匯合度時，按要求比例消化傳代。

三、消化方法

1、將瓶裝的*培養液移入無菌瓶中，留待日后培養用。加消化液0.25% Trypsin-EDTA (1X), Phenol Red消化。

2、T25瓶加3ml PBS，洗一次，棄上清，再加1ml消化液消化，顯微鏡下觀察，等細胞*脫離瓶壁分離成單個后，加培養基混勻，離心收集，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6， 1:6-1:8），每T25瓶加培養基至6-8ml，37℃、5%CO2孵箱培養

蟾毒靈對人肝癌多藥耐藥BEL-7402/5-FU細胞增殖活性的影響

目的 研究蟾毒靈對人肝癌多藥耐藥BEL-7402/5-FU細胞增殖活性的影響.方法 用噻唑藍比色法觀察蟾毒靈及5-氟尿嘧啶、甲氨蝶呤、阿霉素、長春新堿對BEL-7402親本及耐藥細胞的抑制作用;流式細胞術檢測1.00、0.10、0.01 μmol/L蟾毒靈作用24 h 對細胞凋亡率及細胞周期的影響.結果 BEL-7402/5-FU細胞對上述化療藥物均有不同程度的耐藥性.蟾毒靈對BEL-7402親本及耐藥細胞24、48 h 的半數抑制濃度無統計學差異(P＞0.05),可明顯抑制BEL-7402/5-FU細胞生長.不同濃度蟾毒靈作用24 h 后的細胞凋亡率及IC50比較均有統計學差異(P均＜0.01),且細胞G0/G1期降低,G2/M期升高,呈劑量依賴性(P＜0.01).結論 蟾毒靈對人肝癌多藥耐藥BEL-7402/5-FU細胞無交叉耐藥性,有增殖抑制作用,且呈時間、濃度依賴,其作用可能通過阻滯細胞周期進程和誘導細胞凋亡實現的.

　　購買上海琛藝細胞BEL/FU-GFP人肝癌氟尿嘧啶耐藥株-綠色標記 已通過STR鑒定注意事項發布

　　一、客戶收到細胞先不開蓋，放在培養箱靜置若干小時后（看細胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議受收細胞時的培養基拍一張照片，觀察培養基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100X，200X各一張），排除細胞本身污染的情況；

　　收到細胞未開封，出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。

　　二、如為貼壁細胞，請在顯微鏡下觀察細胞密度：

　　1.  未超過80%匯合度時，用75%酒精（建議配置75%酒精的水也是滅菌超純水，噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內，嚴格無菌操作；然后打開蓋子，先用槍頭把培養基吸出10ml左右，放在離心管里，然后瓶口過火（嚴禁直接傾倒），這樣可以保證不污染，再用10ml的移液管，將剩余的培液全部吸出，放于離心管中，培養瓶中只剩余10ml左右培液就可以了。培養16hr(時間根據細胞生長情況調整）之后，傳代或者凍存。

　　2. 超過80%匯合度時，請按細胞培養條件傳代培養。具體步驟如下：

　　1) 棄去培養液，用3ml PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次；

　　2) 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM  EDTA）于T25培養瓶中，倒轉放于37度培養箱1-3分鐘預熱，然后又將培養瓶倒轉大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養培養瓶，細胞隨即脫落下來；

　　3) 加入6-8ml*培養基，吸出，分到新的培養瓶中，按要求分瓶。

　　三、如為懸浮細胞，吸出培養液，1000轉/分鐘離心5分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。

　　注意：換液時一半用我們的培養基，一半用你們的，以免細胞不適應而造成生長不好。

　　四、細胞出現問題，可重發的情況有哪些？判定標準是什么？

　?。?）細胞運輸途中遭遇的各種問題，細胞丟失、破損、漏液等，重發；

　?。?）凍存的細胞復蘇后，絕大多數細胞未存活，重發；

　?。?）存活的細胞靜置24小時后，絕大多數細胞未存活，重發；

　?。?）凍存的細胞復蘇后或存活的細胞靜置4小時后并且未開封，出現污染，重發；

　?。?）視具體情況而定。

　　五、細胞出現問題，不予以重發的情況有哪些？

　?。?）客戶造成細胞污染，不重發；

　　（2）客戶不正確操作致細胞狀態不好，不重發；

　　（3）細胞狀態不好，未提供細胞培養前3天照片的，不重發；

　　（4）細胞培養時經其它處理的，不重發；

　?。?）細胞收到2天內，未告知，不重發；

　　（6）視具體情況而定。