16HBE細胞|人支氣管上皮樣細胞16HBE 已通過STR鑒定產品概述：

細胞名稱：16HBE（人支氣管上皮樣細胞）

種屬：人

年齡（性別）

組織來源

生長特性

貼壁

細胞形態

上皮細胞樣

背景描述

生長培養基

RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S                                      

培養條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

16HBE（人支氣管上皮樣細胞）操作說明：

1)對于常溫運輸的細胞，收到細胞后，檢查是否有運輸問題，即細胞培養瓶或管是否破損，細胞培養液是否溢出。若沒有運輸問題，請75%酒精消毒后，保留封口膜，放入細胞培養箱中靜置。嚴格檢查培養箱的參數：溫度，濕度和CO2濃度。細胞靜置時間一般為6-12小時后，細胞狀態穩定后，即可開始后續操作。選用正確的細胞培養體系，A2780(人卵巢癌細胞)嚴格按照說明書的培養條件進行培養。條件允許，培養的前三天內做細胞拍照記錄，通過郵件發送給我們做及時狀態跟蹤。

2)對于干冰運輸的細胞，請取出冷凍管后，須立即放入37C水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化，并注意水面不可超過冷凍管蓋沿，否則易發生污染情形。然后將其復蘇培養，次日更換培養液。

16HBE（人支氣管上皮樣細胞）注意事項：

1)細胞漂浮：培養瓶不開封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養箱。次日觀察，如細胞大部分又貼回瓶底，表明細胞活力正常，剩余漂浮的細胞可以離心去掉，留10ml培養液培養觀察，細胞生長至匯合度80%，進行消化傳代；如細胞還是不貼壁，將細胞離心收集轉到新培養瓶，原培養瓶加部分培養液繼續培養，中間注意觀察，我們的技術人員會一直跟蹤指導，直到問題解決。

2)對于生長緩慢的貼壁細胞：可采用適當的提高培養基中血清濃度，或隔日換液的方法來保證細胞的狀態和生長速度。

3)對于生長不均的貼壁細胞：在培養過程中若出現細胞分布明顯不均時（即某一區域細胞已重疊生長，而旁邊則為一塊空白），此時可將細胞進行消化，重新打散，貼壁，加入新培養基進行培養。 

16HBE（人支氣管上皮樣細胞）下面介紹幾種細胞培養過程中常見的污染：

一)桿菌污染：培養基中加入抗生素可以減少此種污染，但也不是的。

二)支原體污染：傳說中的黑焦蟲，長得暴快。24小時就滿視野都是了。污染源大多數情況下是培養用血清。

三)念珠菌污染：似乎無處不在，而且頑固得很。長得暴快(12h就能在細胞上面密布)。培養液澄清。低倍顯微鏡下像黑色的沙子鋪在細胞上，高倍鏡下呈樹枝狀或葡萄狀。

四)霉菌污染、比較常見的一種污染，常常來源于污染的空氣、水和器械。

上海琛藝細胞庫簡介：

我公司自有高品質進口來源細胞庫， 所有細胞來源為進口母細胞， 經過永生化處理制成傳代細胞株， 保證為國內高品質傳代細胞株。

另外我們有專門的工程師負責售后維護工作， 保證您購買細胞沒有后顧之憂，  如果對細胞品質不滿意可以無條件退款或免費重新發貨，直到滿意為止。

 細胞處理方法

以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考，具體操作還需要根據到貨時細胞密度，細胞生長狀態等具體情況，酌情處理，如需要更詳細技術指導，請及時電話或郵件聯系。

一．貼壁細胞

客戶接收到細胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養瓶外部。
肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張）。
顯微鏡觀察細胞，當細胞融匯至80%左右（可以傳代的情況下），細胞應該在37度培養箱預溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度，培養瓶應預留一部分培養基繼續培養。
嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。
將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
1000rpm,5min離心，重懸細胞。換新的細胞培養瓶，37℃,5%CO2  培養。
二．懸浮細胞

1. 接收到細胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養瓶外部。

2. 肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張）。

3. 嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。

4. 將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒）。

5. 1000rpm,5min離心，重懸細胞。 換新的細胞培養瓶和新鮮培養基，37℃,5%CO2  培養