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HEp-2細胞|人喉表皮樣癌細胞HEp-2 已通過STR鑒定

來源:上海琛藝實業有限公司   2019年12月12日 11:55  

HEp-2細胞|人喉表皮樣癌細胞HEp-2 已通過STR鑒定

細胞英文(簡稱):HEP-2 [HEP2]

細胞名稱:HEP-2 [HEP2]人喉癌上皮細胞【已通過STR鑒定】

背景資料

初認為這個細胞源自喉上皮癌,但隨后通過同功酶分析、HeLa標記染色體和DNA指紋分析發現,起源細胞已被HeLa污染。 角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。 

細胞來源:ATCC CCL23

代次:P3

規格:T25

細胞數:1x10^6 cells

組織來源:喉

HEP-2 [HEP2]人喉癌上皮細胞【已通過STR鑒定】形態:貼壁

細胞活力:95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)

細胞檢測:細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌

培養條件:DMEM (高糖)+10% FBS;37℃,5% CO2

傳代方法:*建議1:2-1:3 兩天換液一次

凍存條件:90%FBS+10%DMSO

動物細胞培養,大致的步驟是這樣:

1.從動物胚胎或者一些剛出生的動物的器官或者組織上取得細胞,配制成細胞懸浮液.把細胞液放到培養瓶中,在培養箱里培養--------原代培養.

但是,不要以為這樣就能一直無限培養下去.

因為HEP-2 [HEP2]人喉癌上皮細胞【已通過STR鑒定】在那個瓶壁上生長的時候,如果大量增殖,細胞之間會彼此相碰,細胞細胞就會停止分裂增殖,出現一種接觸抑制.

2.我們為了它們能繼續增殖,就用胰蛋白酶再把它們分開,然后再配制成細胞懸浮液,分開裝到好幾個瓶子里繼續培養--------傳代培養.

生長特性:

貼壁生長

 

細胞來源:

從ATCC/中科院/協和醫院等地引進

培養條件

培養基:1640 +10%FBS(推薦德國BI 04-002-1A

優等胎牛血清)

氣相:空氣95%,二氧化碳5%

溫度:37℃

培養:

  • 貼壁細胞

1.用75%酒精噴灑整個瓶消毒,將其平躺置于培養箱中進行2-3小時的緩沖,.然后置于無菌操作臺,打開瓶口,將其中的培養液去掉,再往其中加入5-6mL新鮮培養基并置于細胞培養箱中培養,根據細胞生長狀況及培養基顏色變化對其進行換液以及傳代;

2.待細胞長滿瓶底面積80%-90%,需要對其進行傳代,di一次傳代比例為1:2。

3傳代步驟:將0.25%含EDTA胰酶置于37°預熱,倒掉培養瓶中的培養基,往培養瓶中加入1mlPBS,輕晃洗滌后棄去。往瓶中加1ml預熱好的胰酶,置于37°孵育消化(di一次消化需時常取出置于顯微鏡下觀察,以顯微鏡下細胞觸角回收變圓、輕拍瓶壁見細胞脫落為*消化時間,記錄*消化時間,以便于下次消化),消化好后加入1ml*培養基終止消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細胞,使之*脫落,然后收集細胞懸液,1200rpm離心3min,棄上清,加入*培養基重懸細胞,進行傳代。

 

二、懸浮細胞

1.用75%酒精噴灑整個瓶消毒,然后置于無菌操作臺,打開瓶口,輕輕吹打后,將其中的細胞懸液轉移到離心管中,然后1200rpm離心3min,去上清;

2.將離心好的細胞轉移至T-25瓶中,并加入5-6mL新鮮培養基,然后將其置于細胞培養箱中培養,根據細胞生長狀況及培養基顏色變化對其進行換液(離心后去舊液,加入新鮮培養基);

3.顯微鏡觀察細胞數目比較多時,對其進行傳代,di一次傳代比例為1:2(離心后平均分成兩瓶培養)。

 

細胞總數:

1~3*106

傳代周期:

2-3天

傳代比例:

1:2~1:4

換液頻率:

2-3天

凍存液:

90%FBS+10%DMSO

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