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NCI-H520細胞| 人肺腺鱗癌細胞NCI-H520細胞培養方法

來源:上海琛藝實業有限公司   2019年12月11日 11:45  

NCI-H520細胞| 人肺腺鱗癌細胞NCI-H520細胞培養方法

細胞產品介紹

細胞名稱       NCI-H520 人肺腺鱗癌細胞

生長特性       貼壁生長

形態特性       上皮樣

產品規格       1×10^6 cells/瓶

培養條件       RPMI-1640+10%FBS+1%P/S

生長條件       氣相:5%CO2  95% 空氣   溫度:37 ℃

凍存條件       90%FBS+10%DMSO

背景資料       1982年Gazdar AF等建系,源于鱗狀細胞肺癌組織;該細胞p53 mRNA表達水平較正常肺組織低,但是沒有大的結構DNA的異常。角蛋白、波形蛋白陽性,神經絲三聯蛋白陰性;該細胞在軟瓊脂中可形成克隆。

備注           提供STR鑒定報告

 

NCI-H520 人肺腺鱗癌細胞由上海琛藝實業有限公司提供。公司主營產品:細胞系,中科院細胞庫,原代細胞,ATCC細胞系,抗體。

 

NCI-H520 人肺腺鱗癌細胞

細胞是生命活動的基本單位

細胞是構成有機體的基本單位,是有機體生長與發育的基礎,是代謝與功能的基本單位,是遺傳的基本單位,具有遺傳的全能性,沒有細胞就沒有完整的生命。

細胞株,通過選擇法或克隆形成法從原代培養物或細胞系中獲得具有特殊性質或標志物的培養物,是用單細胞分離培養或通過篩選的方法,由單細胞增殖形成的細胞群。

細胞工程 (cell engineering)是應用細胞生物學和分子生物學原理與方法,人為進行工程學操作,改造生物遺傳特性和生物學特性,以獲得生物產品,或產生新的物種或品系。

細胞工程的核心技術:細胞培養與繁殖,目的:獲得新性狀、新個體、新物質

 

NCI-H520 人肺腺鱗癌細胞 細胞培養

細胞培養是當前細胞生物學乃至整個生命科學研究與生物工程中基本的實驗技術。動物細胞培養為疫苗生產、研制與腫瘤防治等醫學實踐提供了全新的手段。

動物細胞培養的特殊性

1、動物細胞無細胞壁,且大多數哺乳動物細胞只有附著在固體或半固體的表面才能生長。

2、動物細胞對于營養要求更加苛刻,除氨基酸、維生素、鹽類、葡萄糖或半乳糖外,還需要血清。

3、對于培養環境的適應性更差,對環境極其敏感,包括 pH 、溶解氧、溫度、剪切力等都比微生物有更高的要求,一般需嚴格監控。

4、動物細胞生長緩慢,因此培養時間較長。對環境的影響又比微生物為大,因此常用空氣、氧、二氧化碳和氮的混合氣體進行供氧和調節pH。

5.原代細胞培養50代即開始退化

 

NCI-H520 人肺腺鱗癌細胞 培養指南

體外培養的細胞可分為原代細胞(primary culture cell)與傳代細胞(subculture cell)。原代細胞是指機體取出后立即培養的細胞。有人把培養的第1代細胞與傳10代以內的細胞統稱為原代細胞培養,適應在體外培養下條件下持續傳代培養的細胞稱為傳代細胞。分散的細胞懸液在培養瓶中很快(在幾十分鐘至數小時內)就貼附在瓶壁上,這就稱為細胞貼壁。分散呈圓球形的細胞一經貼壁就迅速鋪展并開始有絲分裂,逐漸形成致密的細胞單層,稱為單層細胞(sigle layer cell),這種培養方法稱為單層細胞培養。

對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

 

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注意事項

我司專業的細胞培養員提醒廣大科研人員在購買NB4(NB-4)人急性早幼粒白血病細胞后,切記結合細胞特征、培養條件等認真留意細胞生長情況。收到細胞后,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要處理后方能丟棄。

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