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小鼠纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA試劑盒

來源:上海琛藝實業有限公司   2019年12月02日 09:58  

 小鼠纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA試劑盒

Mouse TAFI ELISA Kit

特異性:本試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關蛋白無交叉反應。

有效期: 6 個月

預期應用: ELISA 法定量測定血清、血漿、細胞培養上清或其它相關生物液體中的含量。

說明

1 .試劑盒保存: -20 ℃(較長時間不用時); 2-8 ℃(頻繁使用時)。

2 .濃洗滌液低溫保存會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。

3 .中、英文說明書可能會有不一致之處,請以英文說明書為準。

4 .剛開啟的酶聯板孔中可能會含有少許水樣物質,此為正常現象,不會對實驗結果造成任何影響。

實驗原理

用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗該指標抗體的微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的抗該指標抗體、 HRP 標記的親和素,經過*洗滌后用底物 TMB 顯色。 TMB 在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標呈正相關。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度( OD 值),計算樣品濃度。

試劑盒組成及試劑配制

1.          酶聯板( Assay plate  ):一塊( 96 孔)。

2.          標準品( Standard ): 2 瓶(凍干品)。

3.          樣品稀釋液( Sample Diluent ): 1 × 20ml/ 瓶。

4.          生物素標記抗體稀釋液( Biotin-antibody Diluent ): 1 × 10ml/ 瓶。

5.          辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 ( HRP-avidin Diluent ): 1 × 10ml/ 瓶。

6.          生物素標記抗體( Biotin-antibody ): 1 × 120 μ l/ 瓶( 1 : 100 )

7.          辣根過氧化物酶標記親和素( HRP-avidin ): 1 × 120 μ l/ 瓶( 1 : 100 )

8.          底物溶液( TMB Substrate ): 1 × 10ml/ 瓶。

9.          濃洗滌液( Wash Buffer ): 1 × 20ml/ 瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋 25 倍。

10.      終止液( Stop Solution ): 1 × 10ml/ 瓶( 2N H 2 SO4 )

人細菌性陰道病(BV)Elisa試劑盒 實驗操作步驟
實驗開始前,請提前配置好所有試劑,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設空白孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔加待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加辣根過氧化物酶標記抗小鼠IgG工作液
100μl(取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見孔內有明顯藍色,即可終止)。
5. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
6. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內進行檢測。

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