DH5α感受態(tài)細(xì)胞詳細(xì)說明書

 

 

貨號	規(guī)格	儲(chǔ)藏
PD6234-10×100μl	10×100μl	-80℃保存
PD6234-20×100μl	20×100μl	-80℃保存

保 存：-80℃保存，運(yùn)輸為干冰包裝。自收貨之日起液氮保存至少一年，-80℃保存至少 6 個(gè)月。

 

產(chǎn)品簡介：

本公司生產(chǎn)的E⁺ DH5α感受態(tài)細(xì)胞是采用大腸桿菌DH5α菌株經(jīng)特殊工藝制備得到，具有無需繁瑣的冰浴、熱擊程序，簡單快速的進(jìn)行質(zhì)粒DNA的轉(zhuǎn)化。使用pUC19 質(zhì)粒檢測，轉(zhuǎn)化效率zui高可達(dá) 2×10⁷cfu/μg，-80℃保存 3-5 個(gè)月轉(zhuǎn)化效率不發(fā)生改變。

基因型:   supE44△lacU169（φ80 lacZ△M15）hsdR17 recA1 end A1 gyrA96 thi-1 relA1

特 點(diǎn): 一種用于鋪制與培養(yǎng)質(zhì)粒平板和粘粒平板的重組缺陷的抑制型菌株。其 φ80 lacZ△M15 基因的產(chǎn)物可與 pUC 載體編碼的 β-半乳糖苷酶氨基端實(shí)現(xiàn) β 互補(bǔ)，可用于藍(lán)白斑篩選。

操作方法：（以下操作均按無菌條件的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行）

00001. 將感受態(tài)細(xì)胞置于冰上融化，以下實(shí)驗(yàn)以 100 μl 感受態(tài)細(xì)胞為例。

00002. 向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入需轉(zhuǎn)化的目的 DNA，注意目的 DNA 的體積不要超過感受態(tài)細(xì)胞懸液體積的十分之一。

00003. 室溫靜置5-10min。

00004. 向離心管中加入 900μl 無菌無抗的 SOC（本試劑盒提供） 或 LB 培養(yǎng)基，37℃ 180 rpm 振蕩培養(yǎng) 30分鐘到1小時(shí)。目的是使質(zhì)粒上相關(guān)的抗性標(biāo)記基因表達(dá)，使菌體復(fù)蘇。

00005. 取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞涂布含相應(yīng)抗生素的 SOC 或 LB 平板，37℃倒置培養(yǎng) 12-16小時(shí)或6-8小時(shí)培養(yǎng)。涂布用量可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)來調(diào)整，如轉(zhuǎn)化的 DNA 總量較多，可取200μl 左右的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂板；反之，如轉(zhuǎn)化的 DNA 總量較少，可4℃，2500g離心5min后，棄去上清約700μl，用剩余約200-300μl 的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂板。過多菌液可以抑制細(xì)菌生長。如果預(yù)計(jì)的克隆較少，可通過離心后吸除部分培養(yǎng)液，懸浮菌體后將其涂布于一個(gè)平板中。

感受態(tài)種類	應(yīng)用
DH5α	實(shí)驗(yàn)室常用的感受態(tài)細(xì)胞，轉(zhuǎn)化效率高，可用于藍(lán)白斑篩選
*0	常規(guī)實(shí)驗(yàn)用克隆感受態(tài)細(xì)胞，生長速度快，轉(zhuǎn)化效率高，可用于藍(lán)白斑篩選
JM109	取高質(zhì)量DNA的理想菌株，可用于構(gòu)建克隆，藍(lán)白斑篩選實(shí)驗(yàn)
Mach1-T1	生長速度快，轉(zhuǎn)化效率高！具有噬菌體抗性
JM110	甲基化基因dam,dcm缺失菌株，只適用于質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化，一般不用于質(zhì)粒構(gòu)建
XL1-Blue	可提取高純度質(zhì)粒DNA，能保證高拷貝質(zhì)粒穩(wěn)定復(fù)制，可用于藍(lán)白斑篩選
XL1-Blue MRF` Kan	菌株來源于XL1-Blue株系，是限制酶系統(tǒng)缺失型，且具有卡那霉素抗性
XL2-Blue	適用于大質(zhì)粒DNA和重組產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化，降低片段大小的偏愛性，多用于文庫構(gòu)建
DB3.1	適用于構(gòu)建或擴(kuò)繁含有ccdB基因的質(zhì)粒載體
XL10-Gold	特異性用于大質(zhì)粒或珍貴連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化或構(gòu)建文庫的超級感受態(tài)細(xì)胞
TG1	生長速度快的克隆用大腸桿菌菌株之一，主要用于噬菌體展示，也可用于普通質(zhì)粒構(gòu)建
HB101	可抑制長片段末端重復(fù)區(qū)的重組，降低錯(cuò)誤重組的概率
Stbl2	適合克隆不穩(wěn)定插入片段，甲基化的基因組序列，以及慢病毒載體的構(gòu)建
Stbl3	慢病毒載體系統(tǒng)推薦使用的菌株
SURE	菌株體內(nèi)重組酶系統(tǒng)整條通路被破壞，提高外源甲基化DNA的克隆效率
DH10B	可提取高純度DNA，適合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA
DH10Bac	DH10Bac菌株主要用于生產(chǎn)重組桿狀病毒分子（Bac-to-Bac桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)）
DH10B-Plus	可提取高純度DNA，適合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA
BJ5183	具有較高重組活力的大腸桿菌菌株，是目前腺病毒系統(tǒng)常用的感受態(tài)細(xì)胞
BJ5183-AD-1	有助于重組DNA的穩(wěn)定和高純度DNA的提取，是目前腺病毒系統(tǒng)常用的感受態(tài)細(xì)胞
Stable	NEB公司開發(fā)的高轉(zhuǎn)化效率菌株，是逆轉(zhuǎn)錄病毒/慢病毒載體系統(tǒng)推薦使用的菌株
Turbo	是目前生長快的菌株
*0F`	可用于一些表達(dá)毒性蛋白質(zhì)粒的擴(kuò)繁
EPI400	可降低質(zhì)粒拷貝數(shù)，特別適合于各種不穩(wěn)定 DNA 或毒性基因的克隆
EPI300	特別適合于各種不穩(wěn)定 DNA 或毒性基因的克隆
GT115	可用來克隆含有發(fā)夾結(jié)構(gòu)（Hairpin）或重復(fù)序列等DNA二級結(jié)構(gòu)的基因序 列的大腸桿菌菌株。
MC1061F-	可用作實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)質(zhì)粒構(gòu)建及噬菌體展示實(shí)驗(yàn)
S17-1	S17-1菌株的染色體中整合了RP4-2質(zhì)粒，可以攜帶染色體的部分DNA在接合菌之間轉(zhuǎn)移
DH5α λpir	在DH5α基因組中引入LAMpir,含有R6Kg ori復(fù)制子的質(zhì)粒可以在其中正常復(fù)制
JM330	可以在體內(nèi)特異性降解甲基化質(zhì)粒模板，廣泛應(yīng)用于各種DNA定點(diǎn)突變試驗(yàn)中。
MG1655	是一種經(jīng)過少數(shù)改造，接近于“WT-野生型”的大腸桿菌工程菌株
ClearColi K12	該細(xì)胞中提取質(zhì)粒DNA中的內(nèi)毒素含量極低，廣泛應(yīng)用于后續(xù)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)。
JM108	擴(kuò)繁質(zhì)粒產(chǎn)量大，純度高，且質(zhì)量穩(wěn)定，特別是超螺旋質(zhì)粒比例較高，超螺旋質(zhì)粒所占比例一般>90%，非常適合后續(xù)的動(dòng)物細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)
BW25113	可作為大腸桿菌模式菌株使用，用來制作各種基因的Knockout突變體

感受態(tài)種類	應(yīng)用
DH5α	實(shí)驗(yàn)室常用的感受態(tài)細(xì)胞，轉(zhuǎn)化效率高，可用于藍(lán)白斑篩選
*0	常規(guī)實(shí)驗(yàn)用克隆感受態(tài)細(xì)胞，生長速度快，轉(zhuǎn)化效率高，可用于藍(lán)白斑篩選
JM109	取高質(zhì)量DNA的理想菌株，可用于構(gòu)建克隆，藍(lán)白斑篩選實(shí)驗(yàn)
Mach1-T1	生長速度快，轉(zhuǎn)化效率高！具有噬菌體抗性
JM110	甲基化基因dam,dcm缺失菌株，只適用于質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化，一般不用于質(zhì)粒構(gòu)建
XL1-Blue	可提取高純度質(zhì)粒DNA，能保證高拷貝質(zhì)粒穩(wěn)定復(fù)制，可用于藍(lán)白斑篩選
XL1-Blue MRF` Kan	菌株來源于XL1-Blue株系，是限制酶系統(tǒng)缺失型，且具有卡那霉素抗性
XL2-Blue	適用于大質(zhì)粒DNA和重組產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化，降低片段大小的偏愛性，多用于文庫構(gòu)建
DB3.1	適用于構(gòu)建或擴(kuò)繁含有ccdB基因的質(zhì)粒載體
XL10-Gold	特異性用于大質(zhì)粒或珍貴連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化或構(gòu)建文庫的超級感受態(tài)細(xì)胞
TG1	生長速度快的克隆用大腸桿菌菌株之一，主要用于噬菌體展示，也可用于普通質(zhì)粒構(gòu)建
HB101	可抑制長片段末端重復(fù)區(qū)的重組，降低錯(cuò)誤重組的概率
Stbl2	適合克隆不穩(wěn)定插入片段，甲基化的基因組序列，以及慢病毒載體的構(gòu)建
Stbl3	慢病毒載體系統(tǒng)推薦使用的菌株
SURE	菌株體內(nèi)重組酶系統(tǒng)整條通路被破壞，提高外源甲基化DNA的克隆效率
DH10B	可提取高純度DNA，適合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA
DH10Bac	DH10Bac菌株主要用于生產(chǎn)重組桿狀病毒分子（Bac-to-Bac桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)）
DH10B-Plus	可提取高純度DNA，適合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA
BJ5183	具有較高重組活力的大腸桿菌菌株，是目前腺病毒系統(tǒng)常用的感受態(tài)細(xì)胞
BJ5183-AD-1	有助于重組DNA的穩(wěn)定和高純度DNA的提取，是目前腺病毒系統(tǒng)常用的感受態(tài)細(xì)胞
Stable	NEB公司開發(fā)的高轉(zhuǎn)化效率菌株，是逆轉(zhuǎn)錄病毒/慢病毒載體系統(tǒng)推薦使用的菌株
Turbo	是目前生長快的菌株
*0F`	可用于一些表達(dá)毒性蛋白質(zhì)粒的擴(kuò)繁
EPI400	可降低質(zhì)粒拷貝數(shù)，特別適合于各種不穩(wěn)定 DNA 或毒性基因的克隆
EPI300	特別適合于各種不穩(wěn)定 DNA 或毒性基因的克隆
GT115	可用來克隆含有發(fā)夾結(jié)構(gòu)（Hairpin）或重復(fù)序列等DNA二級結(jié)構(gòu)的基因序 列的大腸桿菌菌株。
MC1061F-	可用作實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)質(zhì)粒構(gòu)建及噬菌體展示實(shí)驗(yàn)
S17-1	S17-1菌株的染色體中整合了RP4-2質(zhì)粒，可以攜帶染色體的部分DNA在接合菌之間轉(zhuǎn)移
DH5α λpir	在DH5α基因組中引入LAMpir,含有R6Kg ori復(fù)制子的質(zhì)粒可以在其中正常復(fù)制
JM330	可以在體內(nèi)特異性降解甲基化質(zhì)粒模板，廣泛應(yīng)用于各種DNA定點(diǎn)突變試驗(yàn)中。
MG1655	是一種經(jīng)過少數(shù)改造，接近于“WT-野生型”的大腸桿菌工程菌株
ClearColi K12	該細(xì)胞中提取質(zhì)粒DNA中的內(nèi)毒素含量極低，廣泛應(yīng)用于后續(xù)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)。
JM108	擴(kuò)繁質(zhì)粒產(chǎn)量大，純度高，且質(zhì)量穩(wěn)定，特別是超螺旋質(zhì)粒比例較高，超螺旋質(zhì)粒所占比例一般>90%，非常適合后續(xù)的動(dòng)物細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)
BW25113	可作為大腸桿菌模式菌株使用，用來制作各種基因的Knockout突變體