人α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)elisa試劑盒樣品采擷:
收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天進行檢測的標本,儲存在4℃備用,如有特殊原因需要周期收集標本,將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復凍融。標本2-8℃可保存48小時,-20℃可保存1個月。-70度可保存6個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。
人α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)elisa試劑盒質量保證是一個復雜的過程,許多重要的環節都影響到檢測的質量:
一、方法學的影響
ELISA測定模式包括以下幾種:雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競爭抑制法,其中競爭抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時差所引起的不公平競爭等因素的影響,結果重復性較差,質量較難控制。
二、試劑因素
不同批次的ELISA試劑在制作過程中很難保證質量*一致,即使是通過批批檢的項目其檢測結果也存在差異,因此必須選擇和訂購長批號的試劑,并保證保存條件。
三、樣本因素
標本干擾因素包括內源性干擾因素和外源性干擾因素,前者包括類風濕因子、補體、異嗜性抗體、自身抗體、溶菌酶等,后者包括標本溶血、標本被細菌污染、標本貯存時間過長、標本凝固不全、冷凍標本的反復凍融等。
四、操作因素對小鼠腫瘤標志物(CA724)ELISA試劑盒結果的影響:加樣、溫育、洗滌、顯色、比色。
五、灰區的設置
通常情況下,ELISA定性實驗以“陽性"和“陰性"來報告結果,兩者間有一條分界線被稱為“陽性判斷值"(cut-off value,CO值),這是定性免疫測定結果報告的依據。
六、標本復查
ELISA手工檢測過程復雜,影響因素較多,即使室內質控在控,也可能因孔間差異而造成結果的差異,因此加大復查力度是保證結果準確性的可靠方法。
因此人α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)elisa試劑盒在生物醫學各領域的應用范圍日益擴大,可概括四個方面:
1、免疫酶染色各種細胞內成份的定位。
2、研究抗酶抗體的合成。
3、顯現微量的免疫沉淀反應。
4、定量檢測體液中抗原或抗體成份。
人α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)elisa試劑盒實驗原理:
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人骨保護素(OPG)水平。用純化的人骨保護素(OPG)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入骨保護素(OPG),再與HRP標記的骨保護素(OPG)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的骨保護素(OPG)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人骨保護素(OPG)濃度。
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